蘇州地區(qū)醫(yī)院感染調(diào)查研究及金黃色葡萄球菌耐藥表型與基因分析.pdf

1、第一部分2004-2008年蘇州地區(qū)醫(yī)院感染調(diào)查研究 目的:探討蘇州地區(qū)住院患者醫(yī)院感染流行狀況及臨床分離菌株的耐藥特點(diǎn)，揭示醫(yī)院感染的分布規(guī)律和變化趨勢(shì)，為預(yù)防與控制醫(yī)院感染提供科學(xué)依據(jù)。 方法:采用回顧性的調(diào)查方法，對(duì)蘇州地區(qū)2004-2008年32所醫(yī)院住院患者醫(yī)院感染進(jìn)行調(diào)查分析。 結(jié)果:①2004-2008年共有住院患者1976690例，發(fā)生醫(yī)院感染52263例，醫(yī)院感染發(fā)生率為2.6％。②醫(yī)院感染發(fā)生

2、率最高的科室為監(jiān)護(hù)病房(16.1％)，其次為血液科(11.2％)、神經(jīng)外科(7.0％)和神經(jīng)內(nèi)科(6.0％)。③醫(yī)院感染最常見(jiàn)的部位為下呼吸道(40.5％)，其它依次為上呼吸道(21.7％)、胃腸道(11.7％)、泌尿道(9.2％)。④醫(yī)院感染構(gòu)成比男性(57.4％)高于女性(42.6％)。大于60歲的患者醫(yī)院感染構(gòu)成比(45.3％)最高，5-14歲的患者醫(yī)院感染構(gòu)成比(2.9％)最低。⑤醫(yī)院感染最常見(jiàn)的危險(xiǎn)因素為慢性基礎(chǔ)疾病、惡性腫瘤

3、、泌尿道插管與氣管切開(kāi)、插管及放化療，構(gòu)成比分別為17.0％、15.3％、10.7％、7.7％、7.5％。⑥醫(yī)院感染病原菌中，革蘭氏陰性菌構(gòu)成比(46.2％)最高，其次為真菌(29.9％)、革蘭氏陽(yáng)性菌(21.7％)，病毒(1.9％)，其他病原體(0.2％)。⑦革蘭氏陽(yáng)性菌中以表皮葡萄球菌與金黃色葡萄球菌耐藥率最高，分別為63.3％與63.2％。革蘭氏陰性菌中以嗜麥芽黃單胞菌、產(chǎn)堿桿菌、大腸埃希菌及不動(dòng)桿菌最高，分別為67.9％、61.

4、2％、53.5％、51.3％，總體耐藥率呈逐年上升趨勢(shì)。⑧產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌及耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、表皮葡萄球菌(MRSE)的檢出率分別22.8％、17.9％、44.4％與55.4％，除MRSE外，其它三種特殊耐藥菌株的檢出率呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)。 結(jié)論:①近五年來(lái)蘇州地區(qū)醫(yī)院感染率無(wú)明顯變化。②重癥監(jiān)護(hù)病房、血液科、神經(jīng)外科等醫(yī)院感染率最高，是醫(yī)院感染監(jiān)控的重點(diǎn)科室。③醫(yī)院感染的病原菌中

5、，革蘭氏陰性菌占比例最高，其次為真菌、革蘭氏陽(yáng)性菌，真菌所占的比例已超過(guò)革蘭氏陽(yáng)性菌，應(yīng)引起高度重視。④醫(yī)院感染病原菌總體耐藥率均較高，且有逐年上升趨勢(shì)。⑤特殊耐藥菌株如產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)檢出率呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)。 第二部分2004-2008年蘇州地區(qū)醫(yī)院感染葡萄球菌調(diào)查分析 目的:探討蘇州地區(qū)醫(yī)院感染葡萄球菌感染現(xiàn)狀，了解感染的發(fā)病情況、科室分布、病種特點(diǎn)

6、和感染部位分布，分析葡萄球菌對(duì)常用抗生素的耐藥性，為預(yù)防與控制醫(yī)院感染提供依據(jù)。 方法:采用回顧性的調(diào)查方法，對(duì)蘇州地區(qū)2004-2008年32所醫(yī)院住院患者醫(yī)院感染葡萄球菌感染率及耐藥性進(jìn)行分析。 結(jié)果:從2004-2008年32所醫(yī)院共發(fā)生醫(yī)院感染52263例，檢測(cè)出明確病原菌的共23786例，其中金黃色葡萄球菌1684例(7.08％)，各年度分別為190例(5.78％)、316例(7.11％)、373例(8.39％

7、)、412例(7.50％)和393例(6.24％)。其中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)感染例數(shù)分別為66例(34.74％)、107例(33.86％)、138例(37.00％)和219例(52.5％)和217例(55.2％)，合計(jì)747例(44.4％)；醫(yī)院感染表皮葡萄球菌共1060(4.46％)例，各年度所占百分率分別為197例(5.99％)，243例(5.47％)，189例(4.25％)，230例(4.19％)，其中耐甲氧西林表

8、皮葡萄球菌(MRSE)感染例數(shù)分別為118例(59.90％)、128例(52.67％)、99例(52.40％)、134例(58.80％)和98例(48.6％)，合計(jì)577例(54.4％)。葡萄球菌感染部位主要以下呼吸道為主，其中金黃色葡萄球菌與表皮葡萄球菌感染發(fā)生率分別為74.05％，69.72％。藥敏結(jié)果顯示葡萄球菌耐藥率呈逐年升高趨勢(shì)，并呈現(xiàn)多重耐藥性，未出現(xiàn)萬(wàn)古霉素耐藥菌株。 結(jié)論:蘇州地區(qū)醫(yī)院感染葡萄球菌百分率變化不大，

9、但是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methieillin-resistantStaphylococcusAureus.MRSA)所占比例卻在逐年升高，對(duì)14種常用抗生素的耐藥率亦在逐年升高。應(yīng)引起各醫(yī)院高度重視，采取有效措施，控制醫(yī)院感染葡萄球菌尤其是MRSA的發(fā)生及傳播。 第三部分金黃色葡萄球菌耐藥表型與基因分析 目的:探討青霉素結(jié)合蛋白2a(PBP2a)及mecA基因?qū)瘘S色葡萄球菌(Staphylococcusaureus

10、，S.aureus)耐藥性的影響及其β-內(nèi)酶胺酶基因(blaZ)的流行狀況。 方法:①收集2008年3月-2008年9月蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院細(xì)菌室分離的135株金黃色葡萄球菌。②選用臨床常用13種抗菌藥物(苯唑西林、頭孢西丁、青霉素、復(fù)方磺胺、環(huán)丙沙星、利福平、克林霉素、慶大霉素、阿莫西林/克拉維酸、頭孢唑啉、紅霉素、替考拉寧、萬(wàn)古霉素)，采用改良Kirby-Bauer法進(jìn)行敏感性檢測(cè)。③應(yīng)用PBP2a單克隆抗體膠乳檢測(cè)135例

11、金黃色葡萄球菌青霉素結(jié)合蛋白2a(PBP2a)；應(yīng)用細(xì)菌DNA提取試劑盒抽提金黃色葡萄球菌DNA，通過(guò)聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)對(duì)mecA基因進(jìn)行擴(kuò)增，并采用瓊脂糖凝膠電泳法分離mecA基因。④通過(guò)普通PCR法擴(kuò)增β-內(nèi)酰胺酶的編碼基因blaZ，瓊脂糖凝膠電泳法分離blaZ基因。⑤分析PBP2a及mecA基因與金黃色葡萄球菌耐藥性的關(guān)系，并分析blaZ基因的流行狀況。 結(jié)果:①K-B法表型耐藥實(shí)驗(yàn)顯示：135株金黃色葡萄球菌對(duì)13種

12、抗菌藥物的總體耐藥率較高，其中79株(58.5％)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的耐藥率顯著高于56株(41.5％)甲氧西林敏感型金黃色葡萄球菌(Methieillin-sensitiveStaphylococcusAureus.MSSA)。②PBP2a單克隆抗體膠乳凝集試驗(yàn)顯示：135株金黃色葡萄球菌中，76株凝集反應(yīng)陽(yáng)性，59株凝集反應(yīng)陰性。PCR結(jié)果顯示：135株金黃色葡萄球菌中，79株攜帶mecA基因，56株為陰性。③13

13、5株金黃色葡萄球菌中β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性菌株為117例(86.7％)，社區(qū)感染菌株中β-內(nèi)酰胺酶檢出率為72.7％，而醫(yī)院感染菌株中β-內(nèi)酰胺酶檢出率為91.2％，二者具有顯著性差異。 結(jié)論:①金黃色葡萄球菌總體耐藥率較高，MRSA分離率較高，耐藥性更加嚴(yán)重，本實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)萬(wàn)古霉素耐藥菌株。②表型耐藥的金黃色葡萄球菌絕大多數(shù)攜帶有mecA基因(94.9％)；表性敏感的金黃色葡萄球菌少數(shù)攜帶有mecA基因(6.9％)，后者可能是由于me