用于分子自組裝的短肽RADA的合成研究.pdf

1、本課題是國家自然科學基金項目-分子自組裝RADA16-RGD/CPP納米仿生基質(zhì)骨修復材料的研究-(50472091，2005～2007年)中的一部分。可用于骨修復、骨組織工程及藥物緩釋的可降解生物材料RADA16-RGD/CPP是細胞表面可識別的特異結(jié)合基質(zhì)材料。 本文研究用液相法合成可用于分子自組裝的(RADA)<,4>十六肽的最小單元——RADA活性短肽。為進一步研究多肽的分子自組裝提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。 本研究成功地對

2、氨基酸的氨基、羧基以及精氨酸的胍基進行了保護，得到了BocArg(NO<,2>)OH，Z-Ala，BocAsp(OBzl)OH，AlaOBzl·TosOH中間體。這些中間體的結(jié)構(gòu)經(jīng)TLC、熔點、紅外分析確認。在合成Z-Ala時，運用正交實驗設(shè)計優(yōu)選了最佳的實驗條件：當丙氨酸用量為4.685g時，氯代甲酸芐酯(Z-Cl)用量為4ml、反應(yīng)時間2h、pH值9、反應(yīng)溫度25℃，產(chǎn)率最高。 接肽反應(yīng)采用從末端氨基酸開始的反向合成路線。以

3、N-羥基苯并三唑(HOBt)、N，N-二環(huán)己基碳二酰亞胺(DCC)為復合縮合劑，三乙胺調(diào)節(jié)反應(yīng)體系pH，THF為溶劑。保護基團叔丁氧羰基(Boa)用HCl/乙酸乙酯脫去，芐氧羰基(Z)用HBr/HOAc脫去，最后在Pd/C催化下氫解去掉其它的保護基團。反應(yīng)后得到的粗品用硅膠柱色譜純化，粗品肽用乙醇和水重結(jié)晶精制。所得目標化合物的結(jié)構(gòu)經(jīng)TLC、紅外分析、核磁共振氫譜確認。實驗表明，在液相法逐步接肽過程中，用HCl/乙酸乙酯脫叔丁氧羰基(B