漏蘆對小鼠肝損傷的保護作用及機制研究.pdf

1、目的：研究漏蘆對CCl4誘導(dǎo)小鼠肝損傷模型的保護作用及其機制。
　　方法：
　　1、建立CCl4誘導(dǎo)的小鼠肝損傷模型，分別從不同的CCl4刺激濃度和不同的CCl4刺激時間來研究對小鼠的影響；實驗檢測小鼠血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）的活性高低，得到最佳CCl4誘導(dǎo)小鼠肝損傷濃度和刺激時間。
　　2、漏蘆保肝作用研究:急性肝損傷，將昆明小鼠隨機分為正常組、模型組、漏蘆低、中、高劑量組（50、100、2

2、00mg/kg）、益肝靈組（100mg/kg）；正常組和模型組灌胃生理鹽水（20ml/kg），所有組均連續(xù)灌胃7天，末次灌胃8h后，除正常組外其余各組腹腔注射CCl4豆油溶液32mg/kg，禁食不禁水，16h后取血取肝。亞急性肝損傷，分組情況與急性肝損傷一致，連續(xù)灌胃24天，每隔兩天于灌胃8h后，除正常組外其余各組均腹腔注射CCl4豆油溶液32mg/kg，末次灌胃后禁食不禁水，16h后取血取肝。
　　3、采用試劑盒測定小鼠血清AL

3、T和AST活性，肝勻漿中丙二醛（MDA）與還原型谷胱甘肽（GSH）含量，以及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶（GST）、過氧化氫酶（CAT）與谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）活性。采用蛋白印跡技術(shù)檢測小鼠肝組織胞漿中的COX-2、iNOS與微粒體中的HO-1等治療靶點的蛋白表達情況和胞漿中細胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）、p38絲裂原活化蛋白激酶（p38）、c-Jun N-基末端激酶（JNK）與細胞核中核轉(zhuǎn)錄因子-κB（N

4、F-κB）及其磷酸化形式蛋白的表達情況。
　　結(jié)果：
　　1、CCl4對小鼠肝臟的損傷作用在32mg/kg的劑量刺激16h損傷程度顯著，血清中ALT和AST水平較正常組顯著升高（P<0.05），定為最佳條件。
　　2、給予漏蘆后小鼠血清中的ALT和AST活性顯著降低（P<0.01）；肝勻漿中MDA的含量降低（P<0.05）、GSH含量顯著升高（P<0.01），GST和GSH-PX活性升高（P<0.05）、CAT和SOD

5、活性顯著升高（P<0.01）。
　　3、Western blot檢測重要治療靶點，與正常組比較，模型組HO-1、COX-2以及iNOS蛋白表達升高，與模型組比較，用藥組HO-1、COX-2、iNOS的蛋白表達顯著降低；對上游信號通路NF-κB、p38、JNK、ERK及其磷酸化形式蛋白的檢測，與正常組比較，模型組NF-κB、p38、JNK、ERK及其磷酸化形式蛋白的表達均顯著升高，與模型組比較，用藥組中的NF-κB、p38、JNK、