補(bǔ)肝散對感染血吸蟲小鼠肝損傷保護(hù)機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　 運(yùn)用動態(tài)研究方法，觀察補(bǔ)肝散干預(yù)感染血吸蟲小鼠肝損傷模型后，對其肝功能、病理組織及凋亡相關(guān)基因Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)水平的影響，探討補(bǔ)肝散對肝損傷的防護(hù)作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 1、8W齡雄性昆明小白鼠108只，體重23±2g，隨機(jī)分為A正常組(18只)、B模型組(30只)、C補(bǔ)肝散組(20只)、D輔酶Q10組(20只)、E補(bǔ)肝散聯(lián)合輔酶Q10組(20只)，將血吸蟲尾蚴(18條/只)經(jīng)腹部

2、皮膚攻擊感染B、C、D、E組小鼠。以普通小鼠飼料喂養(yǎng)，A、B組于8W、12W、20W及C、D、E組于12W、20W分批定期禁食不禁水24h后，分別隨機(jī)抽取6只小鼠，自小鼠眼眶靜脈叢取血和刨殺留取肝臟標(biāo)本。
　　 2、以含20u肝素試管采集小鼠全血，離心獲取血清，按試劑盒說明書加樣后，用全自動生化分析儀測定肝功能。
　　 3、將標(biāo)本置于10％的中性甲醛中固定，石蠟包埋，制成3陽的連續(xù)切片，進(jìn)行HE染色，觀察肝臟的組織形態(tài)和

3、行免疫組化法檢測Bcl-2、Bax蛋白的表達(dá)水平，圖象分析法半定量記分。
　　 結(jié)果：
　　 1、組織病理學(xué)觀察
　　 正常組肝組織形態(tài)、結(jié)構(gòu)完整，未見任何病變。模型組在感染8W時，可見大量急性蟲卵肉芽腫病變，匯管區(qū)纖維組織增生，周圍有大量炎性細(xì)胞浸潤；部分肉芽中心出現(xiàn)壞死，形成嗜酸性膿腫；12W時，肝細(xì)胞水腫明顯，肝內(nèi)匯管區(qū)蟲卵肉芽腫明顯增多，周圍可見明顯的纖維增生，較多的慢性蟲卵肉芽腫病灶已纖維化；20W時，

4、匯管區(qū)可見大量纖維疤痕病灶，肝細(xì)胞濁腫變性，血竇明顯被壓迫。治療中和治療結(jié)束后各組比較，輔酶Q10組匯管區(qū)周圍蟲卵肉芽腫、肝細(xì)胞炎癥反應(yīng)、肉芽腫周圍和匯管區(qū)纖維程度與模型組相似；而補(bǔ)肝散組，補(bǔ)肝散聯(lián)合輔酶Q10組蟲卵肉芽腫明顯減少，肉芽腫周圍和匯管區(qū)纖維程度明顯減輕，肝細(xì)胞腫脹及肝血竇壓迫現(xiàn)象不明顯。
　　 2、血清生化實(shí)驗(yàn)表明
　　 補(bǔ)肝散組、補(bǔ)肝散聯(lián)合輔酶Q10組與模型組比較，降低ALT，升高A1b，且有顯著性差異(

5、p＜0.05)；與正常組相比無顯著差異(P＞0.05)；輔酶Q10與模型組相比無顯著差異(P＞0.05)。12W時血清AST各組間均無顯著性差異(P＞0.05)；20W時補(bǔ)肝散組、補(bǔ)肝散聯(lián)合輔酶Q10組的AST與模型組比較顯著降低(p＜0.05)，與正常組相比無顯著差異(P＞0.05)；輔酶Q10組與模型組相比無顯著差異(P＞0.05)。
　　 3、免疫組化檢測
　　 Bcl-2、Bax表達(dá)在模型組血吸蟲肝損傷組織中的陽

6、性率均明顯提高，與正常組比較均存在顯著性差異(P＜0.05)，Bcl-2/Bax二者比值逐漸下降。補(bǔ)肝散組與模型組相比使小鼠Bcl-2表達(dá)提高有顯著意義(P＜0.05)；Bax表達(dá)升高無顯著意義(P＞0.05)；且使Bcl-2/Bax比值增高有顯著意義(P＜0.05)。輔酶Q10組使小鼠Bcl-2、Bax表達(dá)均有所提高，且使Bcl-2/Bax比值增高，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。補(bǔ)肝散聯(lián)合輔酶Q10組與補(bǔ)肝散組比較對Bcl-2、Ba

7、x表達(dá)提高及Bcl-2/Bax比值的影響差異無顯著性(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、補(bǔ)肝散能改善肝功能，具有防護(hù)血吸蟲性小鼠肝損傷的作用；
　　 2、補(bǔ)肝散可促進(jìn)Bcl-2表達(dá)、抑制Bax表達(dá)，使Bcl-2/Bax比率上調(diào)，減少肝細(xì)胞的凋亡，進(jìn)而防護(hù)血吸蟲性小鼠肝損傷，發(fā)揮抗纖維化的作用；
　　 3、輔酶Q10對血吸蟲性小鼠肝損傷有一定的防護(hù)作用，與補(bǔ)肝散聯(lián)合可起輔助治療作用，但無統(tǒng)計學(xué)意義。