福壽螺蛋白質(zhì)的提純及抗癌活性研究.pdf

1、蛋白質(zhì)是生物體中含量最高、功能最重要的生物大分子。做為生命的物質(zhì)基礎(chǔ)之一，蛋白質(zhì)在催化生命體內(nèi)各種反應(yīng)、調(diào)節(jié)代謝、抵御外來物質(zhì)入侵及控制遺傳信息等方面都起著至關(guān)重要的作用，實驗研究表明福壽螺蛋白質(zhì)含量豐富。 本實驗以福壽螺為原材料，通過研究不同的鹽濃度、pH值、浸提時間和操作溫度對蛋白質(zhì)提取的影響，再進(jìn)行比較，從而獲得最佳的提取工藝。同時通過硫酸銨分段沉淀、DEAE-32纖維素柱和SephadexG-75柱層析從福壽螺體內(nèi)分離純

2、化到一種相對分子質(zhì)量約為40kd的纖溶活性蛋白，紫外光譜法測定表明，該蛋白具有纖溶作用，經(jīng)SDS-PAGE電泳顯示為一條帶。研究表明該蛋白作用最適Ph值為8.0，最適溫度為59℃，熱穩(wěn)定性較好，金屬離子Na+對酶的活力無影響，而K+，Mg2+，Ca2+可提高此蛋白酶的活力。采用平板法測定此蛋白酶的血纖維蛋白溶解活性，證明此酶具有強烈的纖溶活性。 采用MTT法測定福壽螺蛋白質(zhì)對人舌癌細(xì)胞Tea-8113增殖的抑制效果，結(jié)果表明：福

3、壽螺蛋白質(zhì)在體外能顯著抑制人舌癌細(xì)胞Tea-8113的增殖，藥物濃度為0.0504g/mL，藥物作用時間72h抑制率最高，達(dá)到93％，并呈現(xiàn)明顯的藥物劑量依賴關(guān)系。福壽螺蛋白具有較強的體外抗腫瘤活性。 實驗采用雞胚尿囊膜法在器官和體內(nèi)水平觀察福壽螺蛋白質(zhì)對新生血管生成的抑制效應(yīng)，同時采用紅外光譜分析其主要官能團。結(jié)果表明：福壽螺蛋白質(zhì)對雞胚尿囊膜新生血管生成有良好的抑制作用，比陽性對照（地塞米松）對雞胚生長發(fā)育影響較小；紅外光譜