葒草苷抗心肌缺血藥效評(píng)價(jià)及機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　通過(guò)建立藥物法致大鼠急性心肌缺血及急性心肌梗死模型，綜合評(píng)價(jià)葒草苷（orientin，Ori）的抗心肌缺血藥效，并初步探索其心血管系統(tǒng)保護(hù)作用機(jī)制，旨在為Ori的開(kāi)發(fā)研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　分別建立垂體后葉素(posterior pituitary，Pit)致大鼠急性心肌缺血模型、異丙腎上腺素(isoproterenol，Iso)致大鼠急性心肌缺血模型和Iso致大鼠急性心肌梗死模型;采用多道生理

2、記錄儀采集心電圖(electrocardiogram，ECG)、血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，紫外分光光度法檢測(cè)血清心肌酶活性，光鏡觀察心肌組織病理學(xué)改變，羥胺法檢測(cè)血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性，比色法檢測(cè)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)活性，ELISA法檢測(cè)心肌組織環(huán)鳥(niǎo)苷酸(cyclic guanosine monophosphate，cGMP)水平。

3、r>　　結(jié)果:
　　1.快速舌下靜脈注射1.5U/kg Pit后，大鼠ECG呈現(xiàn)典型心肌缺血兩期變化。一期變化表現(xiàn)為注射Pit后即刻出現(xiàn)ST段抬高，二期變化在注射Pit20-30s后出現(xiàn)，ECG表現(xiàn)為ST段壓低，R波波幅升高，心率減慢(P＜0.001vs.Con)。
　　2.灌胃給藥7天后，地爾硫卓、卡托普利、異山梨酯及鹽酸普萘洛爾均可抑制Pit引起的ST段高度變化(P＜0.05或P＜0.01或＜0.001vs.Mod)。地

4、爾硫卓可使大鼠缺血持續(xù)時(shí)間從(410±173)s縮短至(152±202)s(P＜0.05vs.Mod)。異山梨酯可使R波波幅從(0.102±0.067)mV降低至(0.060±0.041)mV(P＜0.05vs.Mod)。
　　3.腹腔注射Ori4天后，大鼠心肌缺血損傷程度減輕。1.0 mg/kg Ori抑制Pit誘導(dǎo)的大鼠心肌缺血ST段高度變化(P＜0.05或P＜0.01或P＜0.001 vs.Mod)。1.0 mg/kg0ri

5、可使大鼠缺血持續(xù)時(shí)間從（361.6±209.4）s顯著縮短至(24.3±31.9)s(P＜0.01 vs.Mod)，并可使大鼠心率從(292±46)beat/min恢復(fù)至（334±76）beat/min(P＜0.05 vs.Mod)。0.5mg/kgOri也可在一定程度上減小大鼠ST段高度變化，縮短缺血持續(xù)時(shí)間，并加快心率，但與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　4.皮下注射小劑量Iso(0.6mg/kg)，能引起大鼠ST段明顯抬高或倒

6、置(P＜0.05或P＜0.01或P＜0.001vs.Con);注射Is010min后，可引起大鼠心率減慢(P＜0.001vs.Con)。皮下注射0.6mg/kg Iso后1min內(nèi)，立即舌下靜脈注射2.0mg/kg Ori治療，可有效抑制Iso引起的ST段高度變化(P＜0.05vs.Mod)。靜脈給予1.0mg/kg Ori治療的大鼠未見(jiàn)顯著療效，與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。此外，1.0mg/kg及2.0mg/kg Ori對(duì)0.6mg/k

7、g Iso引起的心率減慢未見(jiàn)顯著影響。
　　5.皮下注射大劑量Iso(85mg/kg)，可引起大鼠ST段明顯抬高(P＜0.001vs.Con);并導(dǎo)致左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dt Max)及左室收縮指數(shù)(contraction index，CI)降低，左室舒張末期壓(left ventricular enddiastolic pressure，LVEDP)、左室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dt Max)及左室心肌松弛時(shí)間常數(shù)（

8、τ）升高(P＜0.01或P＜0.001vs.Con)。模型組大鼠血清乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanineaminotransferase，ALT)及谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase，AST)活性顯著升高(P＜0.01vs.Con);模型組大鼠與正常對(duì)照組比較，心肌纖維變性壞死，毛細(xì)血管擴(kuò)張，心肌細(xì)胞間質(zhì)水腫等;模型組大鼠血清SOD和GSH-Px活性降

9、低(P＜0.05或P＜0.001vs.Con)，心肌組織cGMP水平下降(P＜0.05或P＜0.001vs.Con)。
　　與模型組比較，預(yù)防性腹腔注射2.0mg/kg Ori連續(xù)7天，可使大鼠ST段高度變化從(0.090±0.070)mV降低至(0.059±0.028)mV(P＜0.05vs.Mod)。預(yù)防性給予1.0mg/kg及2.0mg/kg Ori可改善大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，1.0mg/kg及2.0mg/kg Ori可使+d

10、p/dt Max從(4170±870)mmHg/s分別升高至（5276±1572）mmHg/s和(5728±874) mmHg/s(P＜0.01或P＜0.001vs.Mod)，使CI從（68±4）s-1分別升高至（82±19)s-1和（89±2）s-1(P＜0.01或P＜0.001vs.Mod)，使-dp/dt Max從(-3399±53)mmHg/s分別降低至（-4223±1410）mmHg/s及（-4999±917mmHg/s(P＜

11、0.01vs.Mod)，并使τ值從（0.048±0.021）s分別降低至(0.031±0.006)s及(0.021±0.009)s(P＜0.05或P＜0.01vs.Mod);預(yù)防性給予2.0 mg/kg Ori還可使LVEDP從(21±7)mmHg降低至(16±9)mmHg(P＜0.01vs.Mod)。預(yù)防性給予1.0mg/kg及2.0mg/kg Ori可降低大鼠血清心肌酶水平，2.0mg/kg Ori可使血清LDH活性從（1297±3

12、02）U/L降低至（982±27）U/L，ALT活性從(64±11)U/L降低至(859±7)U/L，AST活性從（395±122）U/L降低至(331±86)U/L(P＜0.05vs.Mod);Ori可減輕心肌梗死大鼠心肌纖維變性壞死及水腫程度。預(yù)防性給予1.0mg/kg及2.0mg/kg Ori可升高大鼠血清抗氧化酶水平，2.0mg/kg Ori可使血清SOD活性從(164±39)U/mL升高至(230±45)U/mL(P＜0.05

13、vs.Mod)，1.0mg/kg及2.0mg/kg Ori可使GSH-Px活性從（593±55）U/mL分別升高至（672±41）U/mL及（792±79）U/mL(P＜0.01或P＜0.001vs.Mod)。Ori(1.0mg/kg，2.0mg/kg)還可使心肌組織cGMP水平由（0.123±0.025）pmol/mg protein分別升高至(0.433±0.183)pmol/mgprotein及(0.784±0.256)pmol/

14、mg protein，與模型組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.001vs.Mod)。
　　結(jié)論:
　　1.Pit可誘導(dǎo)大鼠急性心肌缺血性損傷，Ori可預(yù)防Pit誘導(dǎo)的急性心肌缺血大鼠心電圖改變，對(duì)心肌缺血性損傷具有保護(hù)作用。
　　2.小劑量Iso可誘導(dǎo)大鼠急性心肌缺血性損傷，Ori可緩解Iso誘導(dǎo)的急性心肌缺血大鼠心電圖改變，對(duì)心肌缺血性損傷具有保護(hù)作用。
　　3.大劑量Iso可誘導(dǎo)大鼠急性心肌梗死，Ori可