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文檔簡介
1、目的:觀察五葉草莓65%醇提液對S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及對其免疫功能的影響,探討五葉草莓65%醇提液的抗腫瘤作用機制,為該藥干預(yù)腫瘤提供理論及實驗依據(jù)。
方法:選健康雄性SPF昆明小鼠 50只,隨機分成5組,每組10只,分別為空白組、模型組、CTX組、五葉草莓65%醇提液高劑量組、五葉草莓65%醇提液低劑量組。在無菌條件下,我們用5ml注射器接8號針頭刺入S180荷瘤小鼠腹腔,采集其腹水,不加抗凝劑,1 ml腹水加1
2、mlPBS液,放入離心機1000 rpm/min,離心6分鐘,連續(xù)2次,棄上清液,取離心后溶液1ml,加入0.2%臺盼藍溶液一滴混勻,在顯微鏡下用血球計數(shù)板計數(shù),經(jīng)檢測,活細(xì)胞率>95%。將離心后溶液用PBS液稀釋,調(diào)整瘤細(xì)胞懸液密度至l×107個/ml,給模型組、CTX組、五葉草莓65%醇提液高劑量組、五葉草莓65%醇提液低劑量組中的每只小鼠右側(cè)腋部皮下注入0.2ml瘤細(xì)胞懸液,接種制成實體瘤模型。所有小鼠用普通飼料喂養(yǎng),除空白組外,
3、五葉草莓65%醇提液高劑量(8.26 g/kg/d)組、五葉草莓65%醇提液低劑量(4.13G/kg/d)組每天給予相應(yīng)劑量的五葉草莓65%醇提液灌胃,陽性對照CTX(0.04 g/kg/d)組每天腹腔注射環(huán)磷酰胺注射液,生理鹽水組每天灌胃量同五葉草莓65%醇提液組相同。以上各組在接種瘤細(xì)胞后第2天開始給藥,連續(xù)給藥14天,第15天稱取小鼠體重,摘眼球取血2ml,然后處死小鼠,剪開小鼠腋下的皮下組織,剝離瘤體、并解剖小鼠,取出其胸腺、脾
4、臟,然后稱重,計算抑瘤率、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù),同時分離其血清,用放射免疫方法檢測血清白介素-2(IL-2)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)。
結(jié)果:CTX組及五葉草莓65%醇提液高、低劑量組的抑瘤率分別為51.69%、45.05%、37.77%,提示環(huán)磷酰胺的抑瘤率最高,五葉草莓65%醇提液有一定的抑瘤作用。五葉草莓65%醇提液高、低劑量組與模型組相比較,其胸腺、脾臟指數(shù)明顯升高,且具有顯著差異(p<0.01),CTX組與模
5、型組比較,胸腺、脾臟指數(shù)明顯降低,且具有顯著差異(p<0.01);五葉草莓65%醇提液高劑量組與模型組比較,其血清IL-2的升高較明顯(P<0.01),五葉草莓65%醇提液低劑量組與模型組比較,其血清IL-2有升高(P<0.01),CTX組的血清IL-2水平降低;五葉草莓65%醇提液高劑量組與模型組比較,TNF-a的升高較明顯(P<0.01),五葉草莓65%醇提液低劑量組與模型組比較,TNF-a亦有升高(P<0.01),CTX組的血清T
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