溫通法對(duì)S180荷瘤小鼠抗腫瘤作用的免疫機(jī)理研究.pdf

1、目的：研究溫通法對(duì)S180荷瘤小鼠的抗腫瘤作用及其與調(diào)節(jié)荷瘤小鼠免疫功能的關(guān)系，探討其抗腫瘤作用的免疫學(xué)機(jī)理。
　　方法：將72只健康昆明種SPF級(jí)小白鼠給予普通SPF級(jí)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)7天后，按照隨機(jī)數(shù)字表法進(jìn)行分組，分為空白對(duì)照組、荷瘤對(duì)照組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組（經(jīng)口灌胃溫通法中藥自制煎劑，中藥低劑量組灌服相當(dāng)于中藥生藥材1.30g/ml的藥液，中藥中劑量組灌服相當(dāng)于中藥生藥材2.56g/ml的藥液，中藥高

2、劑量組灌服相當(dāng)于中藥生藥材3.83g/ml的藥液）、環(huán)磷酰胺注射液腹腔注射組，共計(jì)6組，每組12只?？瞻讓?duì)照組與荷瘤對(duì)照組，均于造模次日同時(shí)給予生理鹽水灌胃，0.2ml/只，每日1次；其中中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組：均于造模次日開(kāi)始給予相應(yīng)濃度的中藥自制煎劑灌胃，0.2ml/只，每日1次；環(huán)磷酰胺腹腔注射組：于造模后72h，使用濃度2mg/ml的環(huán)磷酰胺注射液，腹腔注射0.3ml/只，隔日1次。以上各組均給藥至造模后第12

3、天。末次給藥后次日，取實(shí)驗(yàn)所需標(biāo)本，測(cè)定各治療組荷瘤小鼠瘤體質(zhì)量變化、抑瘤率（IR）和各組的胸腺指數(shù)變化；采用改良四甲基偶氮唑藍(lán)（M T T）比色法測(cè)定自然殺傷細(xì)胞（NKcell）的殺傷活性；采用流式細(xì)胞儀（FACS）法測(cè)定小鼠外周血中T淋巴細(xì)胞CD4+細(xì)胞亞群、CD8+細(xì)胞亞群及CD4+/CD8+的比值變化；應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附分析（ABC-ELISA）法檢測(cè)外周血清中干擾素-γ（IFN-γ）、白介素-2（IL-2）濃度的變化。

4、
　　結(jié)果：
　　（1）瘤體質(zhì)量與抑瘤率實(shí)驗(yàn)中，中藥低、中、高劑量組、環(huán)磷酰胺腹腔注射組與荷瘤對(duì)照組相比，瘤體質(zhì)量明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；中藥低、高劑量組瘤體質(zhì)量與CTX腹腔注射組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。抑瘤率方面，中藥低、高劑量組與 CTX腹腔注射組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　?。?）胸腺指數(shù)實(shí)驗(yàn)中，荷瘤對(duì)照組、中藥低、中、高劑量組、CTX腹腔注射組的胸腺指數(shù)與空

5、白對(duì)照組相比，均明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與荷瘤組相比，中藥低、中、高劑量組胸腺指數(shù)均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；中藥中劑量組與低、高劑量組、CTX腹腔注射組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　?。?）脾臟自然殺傷細(xì)胞的殺傷活性實(shí)驗(yàn)中，中藥中、高劑量組與荷瘤對(duì)照組相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），中藥中劑量組 NK細(xì)胞殺傷活性與中藥低、高劑量組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）

6、；中藥中劑量組與CTX腹腔注射組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　?。?）外周血清T淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，荷瘤對(duì)照組、中藥低、高劑量組、CTX腹腔注射組小鼠的CD4+/CD8+比值，與空白對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與 CTX腹腔注射組相比，中藥低、中、高劑量組 CD4+細(xì)胞亞群的升高、CD8+細(xì)胞亞群的下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　?。?）與荷瘤對(duì)照組相比，中藥低、中、高劑量組小

7、鼠外周血清 IFN-γ含量均明顯升高，差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而環(huán)磷酰胺組 IFN-γ含量顯著低于荷瘤對(duì)照組（P<0.05）。與CTX腹腔注射組相比，中藥低、中、高劑量組小鼠外周血IFN-γ含量都顯著高出于前者的水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。中藥中、高劑量組與荷瘤對(duì)照組相比，外周血 IL-2含量均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　（1）溫通法能提高荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)，在一定程度上

8、能夠提高中樞性免疫器官-胸腺的免疫功能；溫通法中藥中劑量組抑瘤效果最佳。
　?。?）溫通法可能是通過(guò)提高荷瘤小鼠脾 NK細(xì)胞的殺傷活性，從而發(fā)揮其殺傷腫瘤細(xì)胞的功能。
　?。?）溫通法可能是通過(guò)上調(diào)CD4+細(xì)胞亞群，下調(diào)CD8+細(xì)胞亞群，以及改善CD4+/CD8+細(xì)胞亞群比值失衡狀態(tài)，從而起到調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能狀態(tài)的作用，使機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)功能得到進(jìn)一步改善，最終起到抗腫瘤的作用。
　　（4）溫通法可能是通過(guò)增加細(xì)胞因子