化濁顆粒改善2型糖尿病大鼠胰島素抵抗與PI-3K、GLUT4 mRNA表達的影響.pdf

1、目的:觀察化濁顆粒對2型糖尿病模型大鼠磷脂酰肌醇3激酶( phosphatidylinositol-3-kinase,PI-3K)、葡萄糖轉(zhuǎn)運4( glucose transporter4,GLUT4)在骨骼肌組織中表達的影響。制備2型糖尿病大鼠模型,以中藥方制成的化濁顆粒干預(yù) T2DM大鼠,來探討化濁顆粒是否可通過影響 PI-3K及 GLUT4的信號通路的激活,進而改善胰島素抵抗,防治2型糖尿病的分子機制。驗證解毒化濁法改善胰島素抵抗

2、的科學(xué)性和合理性。為開發(fā)中藥胰島素增敏劑提供實驗依據(jù),進而為中醫(yī)藥防治胰島素抵抗奠定基礎(chǔ)。
　　方法:選取60只 SPF級健康、雄性 wistar大鼠(4月齡,200±20g),適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,予普通飼料喂養(yǎng),從中隨機抽出12只作為空白對照,余下48只作為造模組,予高脂飼料喂養(yǎng)4周,采用高脂飼料喂養(yǎng)聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ,30mg.kg-1,連續(xù)給藥3天)腹腔注射的方法,建立2型糖尿病大鼠模型,

3、72h后,禁食12h、不禁水,測定大鼠尾靜脈空腹血糖及 OGTT2小時血糖。如果72h后造模大鼠的 FBG≥7.0mmol/L,OGTT(2hPG)≥11.1 mmol/L,即為造模成功。將造模成功大鼠隨機分為化濁顆粒組(2.025g/kg),羅格列酮組(0.36mg/kg),模型組(1ml/100g),繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng),并與空白組(1ml/100g)一起予以相應(yīng)藥物灌胃治療,其中模型組與空白組均予以生理鹽水灌胃,觀察大鼠一般狀態(tài),體重

4、及攝食量,干預(yù)10w以后,予10％水合氯醛麻醉大鼠,檢測大鼠FBG、OGTT(2hPG)、FINS水平,并應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)方法檢測各組大鼠骨骼肌組織 PI-3K和 GLUT4 mRNA水平的表達。全部數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1.高脂飼料喂養(yǎng)組的體重較普通飼料組顯著增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),高脂飼料組與普通飼料組大鼠的空腹血糖對比,無顯著性差異(P>0

5、.05),但予小劑量 STZ(30mg.kg-1)腹腔注射后,高脂飼料組血糖水平可見明顯升高,與普通飼料組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);實驗中共成模36只,成模率為:36/48=75%,提示成功復(fù)制 T2DM動物模型。
　　2.藥物干預(yù)10w后,羅格列酮組及模型組大鼠的體重同空白組相比均有顯著性增加(P<0.05),化濁顆粒組與模型組相比,體重低于模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),提示:化濁顆粒對肥胖的 T2DM

6、大鼠體重的增長有一定的降低作用。
　　3.造模成功的大鼠與空白組對比,FBG、2hPG、FINS水平均有升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),藥物干預(yù)10w后,化濁顆粒組與羅格列酮組均能降低大鼠 FBG、2hPG及 FINS水平,與模型組對比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);化濁顆粒組與羅格列酮組之間對比,無顯著性差異(P>0.05)。
　　4.RT-PCR結(jié)果:化濁顆粒與羅格列酮干預(yù)的 T2DM大鼠組,其骨骼肌組織P