忍冬種質(zhì)資源評價及栽培生理初步研究.pdf

1、通過對金銀花基原植物忍冬不同種質(zhì)的生長發(fā)育及生理特性進行研究，為忍冬的引種及規(guī)范化栽培提供一定的理論基礎(chǔ)，采用DNA條形碼和實時熒光定量PCR技術(shù)對不同種質(zhì)金銀花藥材進行鑒定，同時對忍冬不同部位中綠原酸代謝關(guān)鍵酶基因表達進行探討，以期為金銀花的分子生物學(xué)相關(guān)研究提供依據(jù)。實驗結(jié)論如下:
　　1.本文收集了忍冬不同種質(zhì)材料12種，通過對不同種質(zhì)忍冬的物候規(guī)律及生長指標的觀察比較發(fā)現(xiàn)，忍冬的萌芽期和新梢生長期開始于2月中旬和3月初，但

2、不同種質(zhì)之間差異較大，現(xiàn)蕾期和開花期開始于4月中旬和4月下旬及5月初，果期多集中開始于11月中下旬及12月初，12月中上旬后開始進入越冬期。
　　2.采用DNA條形碼序列（ITS2和psbA-trnH）對不同種質(zhì)的金銀花進行鑒定，結(jié)果顯示不同種質(zhì)金銀花的ITS2和psbA-trnH序列的擴增及測序成功率均較高，擴增成功率為100％，測序成功率分別為100％。兩序列存在較多變異位點，可以有效地區(qū)分不同種質(zhì)的金銀花。
　　3.本

3、研究測定10個金銀花種質(zhì)類型綠原酸、木犀草苷和總黃酮含量。結(jié)果表明，不同種質(zhì)金銀花的綠原酸、木犀草苷以及總黃酮含量差異顯著。除巨花一號、大毛花、亞特金銀花的金花期外，其它花期綠原酸含量均高于藥典規(guī)定標準。所有種質(zhì)木犀草苷的含量均達到藥典規(guī)定標準(2010)。
　　4.在忍冬抽枝生長初期，葉面噴施不同濃度的多效唑和縮節(jié)胺可增加花枝數(shù)量并延緩枝條生長速度、提高花蕾折干率，對葉片指標影響不顯著。不同濃度的多效唑和縮節(jié)胺均可促進總黃酮和綠

4、原酸含量的提高，最高達34.03％。除多效唑外，在噴施縮節(jié)胺時添加尿素和硼砂可起到促進吸收的作用。
　　5.研究噴施微量元素和氨基酸對忍冬生長發(fā)育和產(chǎn)量質(zhì)量的影響，實驗證明葉面噴施不同濃度的Phe、Lyr以及Zn2+、Cu2+對葉面積無明顯影響。噴施不同濃度的Phe、Lyr可顯著影響碳代謝，對氮代謝影響不明顯。Zn2+、Cu2+對碳氮代謝產(chǎn)物影響較明顯。除Zn2+處理后的花蕾類黃酮含量顯著低于對照外，其他處理較CK無顯著差異。花蕾

5、總黃酮含量均顯著低于對照，但綠原酸含量均高于對照。葉片中離子含量受噴施次數(shù)及濃度影響較明顯。除處理30 mg·L-1 CuSO4外，其它處理的花蕾中Zn2+、Cu2+、Fe2+含量均顯著低于對照。
　　6.研究葉面噴施青霉素對光合效應(yīng)的影響，當濃度升高時，葉片中抗氧化酶活性逐漸升高，高濃度處理(800 mg·L-1)會抑制POD活性;低濃度(400 mg·L-1)的青霉素可顯著提高實際光化學(xué)效率(ΦPSⅡ)、光化學(xué)猝滅系數(shù)(qP)

6、以及電子傳遞速率(ETR)。當濃度為600 mg·L-1時，葉綠素a、b含量分別比對照升高8.6％、58.8％，青霉素濃度為800 mg·L-1時，氣孔導(dǎo)度(Gs)提高162.9％，但對ΦPSⅡ、ETR產(chǎn)生一定的抑制作用，并降低葉綠素的含量。
　　7.通過高效液相色譜儀對金銀花不同組織的綠原酸含量進行了測定，并采用實時熒光定量PCR技術(shù)對綠原酸合成途徑aroB基因的表達進行了分析。結(jié)果表明，金銀花不同組織綠原酸含量高低順序為花蕾＞