毛葉棗種質(zhì)資源果實(shí)品質(zhì)性狀評價及ISSR初步分析.pdf

1、毛葉棗(Zizyphus mauritiana Lam.)又名印度棗、西西果、臺灣青棗，是鼠李科棗屬熱帶亞熱帶優(yōu)稀果樹。毛葉棗果實(shí)脆甜可口、營養(yǎng)豐富，含有果糖、葡萄糖，維生素B、C，鈣、磷、煙酸等，且毛葉棗成熟期一般為冬春季節(jié)，正值水果淡季，市場前景看好。但由于毛葉棗種質(zhì)研究較少，命名的法則不規(guī)范，因此，極有可能造成同物異名或是同名異物現(xiàn)象。而且，隨著毛葉棗產(chǎn)業(yè)的迅猛發(fā)展，表現(xiàn)出品種良莠不齊、果實(shí)的品質(zhì)差等問題，已成為毛葉棗業(yè)蓬勃發(fā)展的

2、瓶頸，因此，如何選育優(yōu)良的品種、提高毛葉棗果實(shí)品質(zhì)成為一個急需解決的問題。 本研究以21個毛葉棗種質(zhì)為試驗(yàn)材料，通過對毛葉棗果實(shí)的外在品質(zhì)、風(fēng)味、內(nèi)在品質(zhì)的測定，并進(jìn)行葉片的ISSR標(biāo)記，旨在找出影響毛葉棗品質(zhì)的主要指標(biāo)和評價方法，建立毛葉棗ISSR反應(yīng)體系，為毛葉棗的良種選育、品種鑒定與分類、遺傳圖譜的構(gòu)建、分子輔助育種等奠定初步基礎(chǔ)。結(jié)果表明： 1、毛葉棗果實(shí)的外觀品質(zhì)指標(biāo)除果實(shí)縱徑外，其余指標(biāo)在品種間差異極顯著，不

3、同毛葉棗種質(zhì)的單果重量介于25.59～99.02g之間，平均單果重為59.48g。果形指數(shù)在0.81～1.27之間，果形在卵圓形～長圓形之間；果皮顏色除福棗有微紅外，其余均為黃綠色。 2、毛葉棗果實(shí)的風(fēng)味主要是由糖、酸含量和糖/酸比決定。毛葉棗果實(shí)糖/酸比介于10.07～84.07之間，果實(shí)的風(fēng)味主要決定因子為含酸量。 3、毛葉棗營養(yǎng)品質(zhì)主要由糖、酸、維生素C等組成，毛葉棗不同種質(zhì)可溶性總糖含糖量差異極顯著，介于8.52

4、～14.59％之間，平均為10.33％；毛葉棗果實(shí)的含酸量較低，平均為0.29％；毛葉棗各種質(zhì)維生素C含量差異極顯著，平均含量為42.48mg.100g-1。 4、通過主成分分析認(rèn)為影響毛葉棗果實(shí)品質(zhì)的主要因素是單果重、可食率和可溶性總糖。 5、通過模糊綜合評判可篩選出所有種質(zhì)中品質(zhì)最好的是未知種，其次為蜜絲和圖棗；最差的是緬甸圓果種。 6、通過果實(shí)品質(zhì)模糊聚類分析，當(dāng)λ=8.0時，可以將供試種質(zhì)分為三類：I類為

5、蜜絲、蜜棗、高朗一號、金蜜棗、大世界1、蜜棗2號、脆蜜、未知種、圖棗、TJ10、大世界2、福棗、肉龍種、碧云種、留香棗共15份種質(zhì)；II類：緬甸圓果、緬甸長果和滇刺棗；Ⅲ類為大果蜜棗、新世紀(jì)和蜜王。 7、使用改良的CTAB(小量)法可以有效的解決毛葉棗基因組總DNA提取中的褐化問題，提取的DNA的A260/A280介于1.7～1.9之間，說明具有較好的純度，完全可以用于ISSR分析。 8、毛葉棗ISSR的最佳擴(kuò)增程序：9

6、4℃預(yù)變性5 min；94℃變性45s，50℃退火1 min，72℃延伸2 min，35個循環(huán)；72℃延伸10 min后4℃保存。 9、毛葉棗ISSR反應(yīng)的最佳體系為：在25μl的反應(yīng)體系含2.59μL濃度為10×pCR的Buffer，3.75μL濃度為2.5mmol.L-1的dNTPs，1.5μL濃度為0.5U.gL-1的Taq酶，1.5μL濃度為5pm.μL-1的引物，0.75μL濃度為100ng.μL-1模板DNA，滅菌雙