楊盤(pán)二孢菌侵染后楊樹(shù)葉片差異表達(dá)蛋白質(zhì)的鑒定.pdf

1、楊樹(shù)是重要的速生用材樹(shù)種，具有頗高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)效益。然而，楊樹(shù)在生長(zhǎng)過(guò)程中不斷受到病蟲(chóng)害的威脅。楊樹(shù)黑斑病是由真菌引起的葉部病害，其主要致病菌為楊盤(pán)二抱菌(Marssonfna brunnea f．sp．multigermtubi)。目前有關(guān)楊樹(shù)與黑斑病菌相互作用的分子機(jī)制仍不清楚。為了鑒定與抗病相關(guān)的蛋白質(zhì)，初步了解楊樹(shù)抗病的分子基礎(chǔ)，以對(duì)楊盤(pán)二孢菌高抗的無(wú)性系NL895楊(P×euramericanaCL“NL 895”)為實(shí)驗(yàn)

2、材料，利用蛋白質(zhì)雙向凝膠電泳(two-dimensional gel electrophoresis，2-DE)技術(shù)和質(zhì)譜(mass spectrometry，MS)技術(shù)等蛋白質(zhì)組學(xué)方法研究了該無(wú)性系接種楊盤(pán)二孢菌0、12、24、48、 72 h后葉片蛋白表達(dá)譜的變化。PDQuest<'TM>(Bio-Rad)軟件分析后，共獲得了約500個(gè)重復(fù)性表達(dá)的蛋白點(diǎn)，其中有40個(gè)蛋白點(diǎn)差異表達(dá)?；|(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)J司質(zhì)譜(Matrix

3、assisted laser desorption/ionization time of flight massspectrometry，MALDI-TOF MS)對(duì)這些差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行了分析和數(shù)據(jù)庫(kù)搜索。所鑒定的蛋自主要包括推測(cè)的抗壞血酸過(guò)氧化物酶(putative ascorbate peroxidase)，S-腺苷甲硫胺酸合成酶(S-adenosyl methionine synthetase)，鈣調(diào)素結(jié)合蛋白(calmodulin

4、binding protein)，醌氧化還原酶類(lèi)蛋白(quinone oxidoreductase-like protein)，賴(lài)氨酸酮戊二酸酯還原酶/酵母氨酸脫氫酶(Lysine-ketoglutaratereductase/saccharopine dehydrogenase)，F(xiàn)-box蛋白(F-box protein)，UMP/CMP激酶(UMP/CMP kinase)，乙烯反應(yīng)傳感蛋白(ethylene response se

5、nsor)，翻譯起始因子(translation initiation factor)，等，這些蛋白可能與植物的防御應(yīng)答密切相關(guān)。此外，還有一些蛋白屬于核酮糖二磷酸羧化酶/加氧酶(ribulose-1，5-bisphosphatecarboxylase/oxygenase，RuBisCO)家系成員，這些蛋白中的多數(shù)在病原脅迫下表達(dá)下調(diào)。根據(jù)功能，所鑒定的蛋白主要分成五類(lèi)，包括與光和合成、蛋白合成、能量代謝、防御應(yīng)答相關(guān)蛋白及未分類(lèi)的蛋白