白念珠菌耐藥株的蛋白質組與基因表達譜分析及差異蛋白質與差異基因的識別鑒定.pdf

1、白念珠菌對氟康唑耐藥性的獲得是臨床治療白念珠菌感染失敗的主要原因。白念珠菌耐藥性的獲得是多基因在多層級水平變異積累的復雜過程。因此從整體水平系統(tǒng)地分析耐藥白念珠菌的基因表達譜及蛋白表達譜，鑒定耐藥相關基因與蛋白質，了解其功能成為必然。本研究成功建立氟康唑誘導的白念珠菌耐藥株。建立和優(yōu)化了白念珠菌的蛋白質組分析中的二維凝膠電泳技術，并用于分離和分析敏感親本和誘導耐藥白念珠菌總蛋白質的差異，獲得了敏感親本和耐藥子代總蛋白質表達譜，鑒定24種

2、顯著差異表達的蛋白質，進一步驗證了以往研究發(fā)現(xiàn)的耐藥相關蛋白(Ald5p，Cdc19p，Gap1p，Grp2p，Mdh1p，Mir1p，Ynk1p，Pot14p)，發(fā)現(xiàn)一組新的可能耐藥相關蛋白(Adh1p，F(xiàn)ba1p，Gpm1p，Idh1p，Mls1p，Pgk1p，Qcr7p，Rps5p，Ssa4p，Tsa1p，Tpi1p，Zuo1p，IPF4328，IPF16253)，并從全新的角度闡述了白念珠菌耐藥發(fā)生過程中代謝增強以及自身防御機制

3、。本研究采用cDNA芯片技術從mRNA水平獲得了敏感親本和耐藥子代基因差異表達的信息，揭示了耐藥子代因CDR1、CDR2高表達而使細胞膜外轉運功能增強的分子機制，闡明了細胞膜麥角甾醇減少時ERG2、ERG9等甾醇生物合成通路相關酶代償性增加的分子事件，并根據(jù)一組菌絲、毒力相關基因(EFG1、SNF1、HST7等)的表達變化推測其耐藥性發(fā)生時形態(tài)與毒力的分子變化路徑。運用功能基因組學研究方法有助于掌握耐藥白念珠菌的蛋白質和基因表達譜及差異