子宮內(nèi)膜癌蛋白質(zhì)組的差異表達分析及意義.pdf

1、目的：運用蛋白質(zhì)組學雙向凝膠電泳和質(zhì)譜技術(shù)，研究子宮內(nèi)膜癌組織與正常子宮內(nèi)膜組織蛋白質(zhì)組表達圖譜的差異，尋找和確定子宮內(nèi)膜癌差異表達蛋白質(zhì)，分析其中與子宮內(nèi)膜癌相關蛋白質(zhì)，為進一步研究子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展機制奠定基礎。 方法: 1、雙向凝膠電泳分離子宮內(nèi)膜癌組織與正常子宮內(nèi)膜組織的總蛋白。 2、用ImgemMster圖像分析軟件檢測雙向電泳實驗的重復性和差異表達蛋白。 3、應用質(zhì)譜鑒定所篩查的差異表達蛋白

2、。 4、應用RT-PCR技術(shù)對篩選出的部分差異表達蛋白在mRNA水平進行驗證。 結(jié)果: 1、獲得穩(wěn)定的高分辨率和重復性的子宮內(nèi)膜癌組織與正常子宮內(nèi)膜組織雙向電泳圖譜。測得子宮內(nèi)膜癌組織與正常子宮內(nèi)膜組織各3塊凝膠的平均蛋白質(zhì)點數(shù)分別為1556±38和1657±31。 2、子宮內(nèi)膜癌組織與正常子宮內(nèi)膜組織相比較，經(jīng)雙向凝膠電泳軟件分析，共找到27個差異表達的蛋白質(zhì)，其中22個蛋白質(zhì)在子宮內(nèi)膜癌組織中含量增加

3、，5個蛋白質(zhì)含量減低。 3、對差異蛋白質(zhì)進行質(zhì)譜鑒定，質(zhì)譜鑒定出15種與子宮內(nèi)膜癌相關的差異蛋白質(zhì)，其中13種在子宮內(nèi)膜癌組織中表達上調(diào)的蛋白質(zhì)為p48，烯醇酶，ATP合酶，膜聯(lián)蛋白，蛋白質(zhì)延長因子-α1，Unknown(protein for IMAGE：3897065)，硫氧還蛋白過氧化物酶6，加帽蛋白Cap G，焦磷酸酶1，過氧化物歧化酶突變體Q143n，蛋白質(zhì)二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)前體，丙酮酸激酶M1/M2，亮

4、氨酸氨基肽酶，2種在子宮內(nèi)膜癌組織中表達下調(diào)的蛋白質(zhì)為Stathmin 1，α1-抗胰蛋白酶。 4、通過RT—PCR技術(shù)在基因水平對p48，烯醇酶，ATP合酶，膜聯(lián)蛋白，蛋白質(zhì)延長因子1-α1，Stathminl這6個蛋白質(zhì)的mRNA表達水平進行驗證，結(jié)果與質(zhì)譜結(jié)果一致。 結(jié)論: 1、應用蛋白質(zhì)組學研究方法篩選鑒定出15種與子宮內(nèi)膜癌癌變相關的蛋白質(zhì)，這些蛋白涉及能量代謝相關的多種酶、抗氧化相關蛋白、細胞增殖調(diào)控蛋白以及