結(jié)腸黑變病差異蛋白質(zhì)譜分析.pdf

1、目的：
　　通過(guò)利用有關(guān)差異蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)技術(shù)（雙向凝膠技術(shù)以及生物質(zhì)譜分析技術(shù)）尋找出關(guān)于結(jié)腸黑變?。∕C）與結(jié)腸癌、正?；颊卟町惐磉_(dá)的蛋白質(zhì)質(zhì)譜圖，應(yīng)用Mascot軟件在NCBInr數(shù)據(jù)庫(kù)檢索比對(duì)差異的蛋白質(zhì)，在生物蛋白質(zhì)分子水平探討結(jié)腸黑變病與結(jié)腸癌之間的關(guān)聯(lián)及差異的蛋白質(zhì)，分析與臨床意義相關(guān)聯(lián)的蛋白質(zhì)分子。
　　方法：
　　通過(guò)雙向凝膠電泳技術(shù)（2-DE）獲取MC與結(jié)腸癌及正常組織之間的差異蛋白質(zhì)凝膠圖，結(jié)合軟

2、件分析和手工篩選，查找凝膠圖中表達(dá)差異大于1.5倍的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)，選出的差異點(diǎn)后通過(guò)酶解及生物質(zhì)譜分析（MALDI-TOF/TOF-MS）獲取相關(guān)的差異蛋白質(zhì)信息并進(jìn)行分析，了解其功能及產(chǎn)生差異機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　根據(jù)MC與正常結(jié)腸黏膜、結(jié)腸癌的二維凝膠掃描顯示圖像分析獲得的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)量為1970±138，2028±176、2150±240，應(yīng)用imagemaster7.0軟件進(jìn)行圖像對(duì)比分析后，總共找到倍比大于1.5倍

3、的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)14個(gè)。結(jié)腸黑變病（MC）和正常結(jié)腸組織相比較表達(dá)的量的差異大于1.5倍的點(diǎn)有6個(gè)，其中在結(jié)腸黑變病黏膜組織中表達(dá)上調(diào)的差異點(diǎn)有2個(gè)，表達(dá)下調(diào)的差異點(diǎn)有4個(gè)，僅在結(jié)腸黑變病黏膜組織中表達(dá)的差異點(diǎn)有1個(gè)（P＜0.05）；結(jié)腸黑變病黏膜組織與結(jié)腸癌黏膜組織對(duì)比表達(dá)的量的差異大于1.5倍的點(diǎn)有8個(gè)，其中在結(jié)腸黑變病黏膜組織中表達(dá)上調(diào)的差異點(diǎn)有1個(gè)，在結(jié)腸癌黏膜組織中表達(dá)上調(diào)的差異點(diǎn)有7個(gè)。僅在結(jié)腸癌黏膜組織中表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)有2個(gè)（

4、P＜0.05）。質(zhì)譜分析和數(shù)據(jù)庫(kù)檢索共鑒定出8種蛋白質(zhì)，包括KRT8/18、FGB fibrinogen、CAT Catalase、PSMC626S protease、TPM4等。
　　結(jié)論：
　　生物質(zhì)譜分析（MALDI-TOF/TOF-MS）很好地顯示MC組織與結(jié)腸癌組織以及正常結(jié)腸組織間的蛋白質(zhì)表達(dá)差異，為MC、結(jié)腸癌的研究提供新思路、新線索。本研究最終所鑒定出的8種不同表達(dá)的蛋白質(zhì)，這些蛋白的不同表達(dá)表明可能參與結(jié)腸