重型肝炎預(yù)后相關(guān)蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析及預(yù)測(cè)模型構(gòu)建.pdf

1、目的：本研究旨在通過(guò)應(yīng)用 SELDI-TOF-MS(surface enhanced laser desorption/ionization time-of flight mass spectrometry)技術(shù)獲得HBV相關(guān)重型肝炎不同臨床結(jié)局患者和正常人血漿中的蛋白質(zhì)指紋圖譜，篩選出與重型肝炎患者預(yù)后相關(guān)的差異蛋白，并利用這些差異蛋白初步構(gòu)建重型肝炎的預(yù)后預(yù)測(cè)模型，為重型肝炎預(yù)后判斷提供可靠的、敏感的指標(biāo)。
　　方法：收集西南

2、醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院感染科住院部HBV相關(guān)重型肝炎患者35例和我院體檢中心健康志愿者15例的血漿標(biāo)本，分別作為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。同時(shí)收集患者的人口學(xué)資料和臨床資料（包括肝功能、凝血功能等）。實(shí)驗(yàn)組患者隨訪時(shí)間至少12周。根據(jù)隨訪患者病情的轉(zhuǎn)歸不同分為死亡組和存活組。應(yīng)用SELDI-TOF-MS蛋白質(zhì)芯片技術(shù)檢測(cè)HBV相關(guān)重型肝炎患者和正常健康人血漿樣本，獲得弱陽(yáng)離子交換芯片CM10的蛋白質(zhì)指紋圖譜。使用ProteinChip3.2軟件和Bio

3、markerWizard軟件識(shí)別蛋白指紋圖譜，并利用SPSS16.0軟件對(duì)所采集的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，利用Biomarker Patterns(BPS5.0)軟件采用樹形分類方法對(duì)HBV相關(guān)重型肝炎患者初步建立預(yù)后預(yù)測(cè)模型，并計(jì)算該模型對(duì) HBV相關(guān)重型肝炎患者預(yù)后判斷的敏感性和特異性。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）描述。組間比較采用兩個(gè)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。以P＜0.05示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：CM10蛋白芯片檢測(cè)結(jié)果顯示，H

4、BV相關(guān)重型肝炎患者和健康對(duì)照組血漿樣本在蛋白分子量1000Da-50000Da的范圍內(nèi)一共檢測(cè)出57個(gè)蛋白峰表達(dá)水平有差異，其中與健康對(duì)照組相比較，重型肝炎存活組有25個(gè)蛋白峰表達(dá)有顯著差異（P＜0.05），其中有6個(gè)蛋白峰顯著升高，它們是M2017_57、M7568_86、M7937_87、M15109_0、M15268_2、M15845_0；有19個(gè)蛋白峰顯著降低，它們是M2196_71、M2235_78、M2747_23、M27

5、96_85、M2881_48、M2913_26、M3224_17、M3322_84、M4309_41、M6437_01、M6634_84、M6839_64、M8601_12、M9185_56、M28057_7、M33395_2、M34404_9、M44842_1、M45146_8。重型肝炎死亡組有24個(gè)蛋白峰表達(dá)有顯著差異（P＜0.05），其中有6個(gè)蛋白峰顯著升高，它們是M2017_57、M6634_84、M7568_86、M7937_

6、87、M15268_2、M15845_0；有18個(gè)蛋白峰顯著降低，它們是M2235_78、M2747_23、M2881_48、M2913_26、M3224_17、M3322_84、M3376_49、M4309_41、M5908_26、M6437_01、M6584_63、M6839_64、M8601_12、M14670_8、M15109_0、M28057_7、M33395_2、M34404_9。重型肝炎存活組和死亡組比較發(fā)現(xiàn)有16個(gè)蛋白峰

7、表達(dá)有顯著差異（P＜0.05），它們分別是M3376_49、M3479_65、M3492_79、M3936_56、M5649_11、M7568_86、M7766_46、M7937_87、M8601_12、M9290_44、M11692_6、M14670_8、M15109_0、M15268_2、M15845_0、M45146_8。應(yīng)用Biomarker Patterns軟件對(duì)重型肝炎存活組和死亡組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的蛋白峰進(jìn)行比較分析，并最

8、終篩選出5個(gè)差異蛋白峰組成樹形決策模型。這5個(gè)差異蛋白峰分別是 M3492_79、M5649_11、M3936_56、M7568_86和M8601_12，所建立的模型對(duì)重型肝炎預(yù)后判斷的敏感性為72.00％，特異性為100.00%。
　　結(jié)論：
　　1.應(yīng)用SELDI-TOF-MS技術(shù)可以發(fā)現(xiàn)HBV相關(guān)重型肝炎發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中某些蛋白質(zhì)表達(dá)水平有差異，不同臨床結(jié)局的重型肝炎患者血漿蛋白峰表達(dá)差異比較顯著。
　　2.利用