4周有氧運動對心房肌蛋白質組及基因差異表達的影響.pdf

1、目的：
　　 本研究探討4周有氧運動對大鼠心房肌蛋白質組差異表達的影響，篩選出心房肌中與有氧運動適應密切相關的目標蛋白質點，并對部分目標蛋白質點的mRNA表達水平進行研究，為深入研究長期規(guī)律的有氧運動促進心臟健康；為全民健身運動及慢性心血管疾病的運動康復研究提供新的思路及理論依據(jù)與實驗基礎。
　　 方法：
　　 20只SD雄性大鼠按體重和運動能力隨機配對分為運動組和對照組(n=10)。采用跑臺運動的方式，適應性訓

2、練后，復制24m·min-1×40min運動強度負荷持續(xù)訓練4周的有氧運動實驗動物模型(負荷強度相當于60～70％VO2max)。最后一次訓練后6小時，運動與對照組的大鼠同時麻醉處死，提取心房肌組織的全蛋白，采用雙向凝膠電泳技術對蛋白質進行分離，運用BioPDquest圖像分析軟件對2-DE圖譜進行分析，并應用串聯(lián)飛行時間質譜儀對其中表達量變化上調5倍以上及下調至1/5以下的13個目標蛋白質點進行質譜鑒定，用逆轉錄-聚合酶鏈式反應(RT

3、-PCR)技術檢測對7個目標蛋白質的基因表達水平檢測。
　　 結果：
　　 ①經4周有氧運動后，與對照組相比，大鼠的心臟重量的百分率增加了1.7％，心重指數(shù)增加了32％(P<0.05)；②在2-DE電泳圖譜上運動組檢測到蛋白質點370±35個，安靜對照組檢測到422±7個，運動后差異表達的蛋白質點共有53個，未見新增或缺失的蛋白質點，其中表達量上調5倍以上的點有5個，下調5倍的點8個，對篩選出的13個蛋白質點進行質譜分析

4、，成功鑒定出11種蛋白質和一個分子量為54KDa的未知蛋白，如丙酮酸脫氫酶Elαl、甲基丙二酸半醛脫氫酶[?；鵠、絲裂素活化蛋白激酶3。③RT-PCR檢測結果：運動組大鼠心房肌中甲基丙二酸半醛脫氫酶、細胞質蘋果酸脫氫酶的mRNA相對凈光密度值低于對照組(P<0.05)；線粒體二氫硫辛酸脫氫酶、谷胱甘肽合成酶、線粒體烏頭酸水合酶、蛋白質二硫鍵異構酶A3的mRNA相對凈光密度值低于對照組(P>0.05)；異戊烯輔酶A脫氫酶mRNA相對凈光密

5、度值高于對照組(P>0.05)。
　　 結論：
　　 (1)經過4周有氧運動后，大鼠心房肌蛋白質組差異表達顯著，包括蛋白質點數(shù)目的差異變化和蛋白質點表達強度的大幅度上調或下調。(2)質譜鑒定出來的丙酮酸脫氫酶Elαl、線粒體烏頭酸水合酶等目標蛋白的上調與提高心肌細胞能量代謝水平有關。絲裂素活性蛋白激酶3的上調與促使心肌細胞肥大增殖有關，表明中等強度有氧運動也能像大強度運動一樣，導致運動心臟重塑，改善心臟的收縮泵血功能。(