運(yùn)動(dòng)心臟重塑過程中大鼠左室肌蛋白質(zhì)組差異表達(dá)的研究.pdf

1、目的：蛋白質(zhì)是生物體功能的執(zhí)行者，運(yùn)動(dòng)心臟的重塑、病理心臟的變化均源于蛋白的改變，且兩者之間具有本質(zhì)區(qū)別。本研究從蛋白質(zhì)組學(xué)整體、定量的角度，探討中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)過程中，大鼠左室肌蛋白質(zhì)組的差異表達(dá)及其規(guī)律，初步篩選在運(yùn)動(dòng)心臟重塑中發(fā)揮重要作用的目標(biāo)蛋白質(zhì)，為揭示運(yùn)動(dòng)心臟重塑的機(jī)制提供新的依據(jù)，為慢性心血管疾病的運(yùn)動(dòng)康復(fù)或輔助治療提供新的借鑒。 方法：以54只雄性SD大鼠為研究對象，按體重隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和平行對照組(各3組，每組n=

2、9)。實(shí)驗(yàn)組經(jīng)4、8和12周中等負(fù)荷(70-80％VO2max)跑臺(tái)訓(xùn)練后6h，與平行對照組同時(shí)麻醉處死，計(jì)量大鼠心重，提取左室肌組織的全蛋白樣品。采用雙向凝膠電泳進(jìn)行蛋白樣品分離，采用PD-Quest軟件進(jìn)行圖像分析和數(shù)據(jù)采集。選擇運(yùn)動(dòng)后差異表達(dá)量≥10倍的點(diǎn)作為備選目標(biāo)蛋白點(diǎn)，進(jìn)行膠內(nèi)原位酶解與一、二級(jí)質(zhì)譜鑒定。 結(jié)果：經(jīng)4、8、12周運(yùn)動(dòng)后，實(shí)驗(yàn)組大鼠心重指數(shù)分別增加18.5％、34.5％與36.6％(P<0.05)。4周

3、實(shí)驗(yàn)組和對照組分別檢測到584±23和555±33個(gè)蛋白點(diǎn)，差異表達(dá)量≥10倍的點(diǎn)共13個(gè)，運(yùn)動(dòng)后上調(diào)4個(gè)，下調(diào)9個(gè)；8周為499±29和495±26個(gè)，蛋白質(zhì)差異表達(dá)量≥10倍的點(diǎn)與第4周同；12周為578±27和587±26個(gè)，差異表達(dá)量≥10倍的點(diǎn)共有4個(gè)，全部表現(xiàn)為新出現(xiàn)的上調(diào)點(diǎn)。取17個(gè)差異點(diǎn)中的5個(gè)備選目標(biāo)蛋白點(diǎn)，經(jīng)一、二級(jí)質(zhì)譜鑒定出葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)、烯酰輔酶A水合酶(ECH)和ATP合酶a亞基等3種運(yùn)動(dòng)后上

4、調(diào)的蛋白質(zhì)，及運(yùn)動(dòng)后下調(diào)的ATP合酶偶合因子6(CF6)和一個(gè)分子量為116kDa的未知蛋白。 結(jié)論：①經(jīng)12周中等強(qiáng)度負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后，實(shí)驗(yàn)組大鼠的心臟增大。②實(shí)驗(yàn)組大鼠在心臟重塑過程中，左室肌蛋白質(zhì)組在4周運(yùn)動(dòng)后發(fā)生顯著性差異表達(dá)，8、12周運(yùn)動(dòng)后蛋白質(zhì)組出現(xiàn)適應(yīng)性變化。③采用中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)進(jìn)行心臟重塑，可使心肌能量代謝水平提高、心肌應(yīng)激反應(yīng)與適應(yīng)能力增強(qiáng)、血壓調(diào)節(jié)能力改善，運(yùn)動(dòng)大鼠心臟出現(xiàn)良好的適應(yīng)性變化。④篩選出在運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中