遞增運(yùn)動(dòng)負(fù)荷訓(xùn)練對(duì)大鼠心房肌蛋白質(zhì)組影響的研究.pdf

1、本研究主要探討遞增運(yùn)動(dòng)負(fù)荷訓(xùn)練對(duì)大鼠心房肌蛋白質(zhì)組的影響，以篩選出心房肌組織中對(duì)運(yùn)動(dòng)應(yīng)激具有重要意義的差異性表達(dá)的目標(biāo)蛋白質(zhì)，在蛋白質(zhì)組學(xué)水平上研究運(yùn)動(dòng)性疲勞的發(fā)生、發(fā)展的規(guī)律。研究運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)的理論與技術(shù)方法，將10只雄性SD大鼠，分為運(yùn)動(dòng)組(n=5)和對(duì)照組(n=5)。遞增運(yùn)動(dòng)負(fù)荷訓(xùn)練7周，力竭運(yùn)動(dòng)后6小時(shí)，運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組同時(shí)麻醉處死。提取心房肌組織的全蛋白，依次對(duì)樣品蛋白進(jìn)行PH梯度-SDS雙向凝膠電泳分離蛋白、改良考馬氏亮藍(lán)方

2、法染色、基質(zhì)輔助激光解吸離子化飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜分析。 測(cè)得運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組蛋白質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)目分別是354±40個(gè)和382±24個(gè)，匹配率分別為68.67％±9.87％和72.67％±8.62％，相關(guān)系數(shù)為0.71；共獲得具有兩倍以上差異性表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)104個(gè)；運(yùn)動(dòng)后上調(diào)兩倍以上的蛋白質(zhì)點(diǎn)66個(gè)，其中運(yùn)動(dòng)后上調(diào)五倍以上的蛋白質(zhì)點(diǎn)18個(gè)，未見(jiàn)運(yùn)動(dòng)后新增的蛋白質(zhì)點(diǎn)；運(yùn)動(dòng)后下調(diào)兩倍以上的蛋白質(zhì)點(diǎn)38個(gè)，其中運(yùn)動(dòng)后下調(diào)五倍以上的蛋白質(zhì)點(diǎn)23個(gè)

3、，運(yùn)動(dòng)后消失的蛋白質(zhì)點(diǎn)7個(gè)。選擇差異性表達(dá)五倍以上的蛋白質(zhì)點(diǎn)為目標(biāo)蛋白進(jìn)行質(zhì)譜分析，共鑒定出5個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)：運(yùn)動(dòng)后上調(diào)的蛋白質(zhì)有心房型心肌肌球蛋白輕鏈-1、谷草轉(zhuǎn)氨酶；運(yùn)動(dòng)后下調(diào)、“缺失”的蛋白質(zhì)有α-心肌型肌球蛋白重鏈。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:在運(yùn)動(dòng)應(yīng)激狀態(tài)下，大鼠心房肌蛋白質(zhì)發(fā)生了明顯的差異性表達(dá)，這些差異性表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)為進(jìn)一步深入研究具有運(yùn)動(dòng)性疲勞特征的新的目標(biāo)蛋白提供了充分的實(shí)驗(yàn)依據(jù)；運(yùn)動(dòng)應(yīng)激條件下大鼠心房肌蛋白質(zhì)的差異性表達(dá)與

4、心肌組織的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、能量代謝、物質(zhì)代謝以及心肌功能的改變有關(guān)。2-DE圖譜中，運(yùn)動(dòng)組表達(dá)量明顯下調(diào)和消失的目標(biāo)蛋白質(zhì)，經(jīng)質(zhì)譜鑒定，與肌肉收縮、運(yùn)動(dòng)能力下降及運(yùn)動(dòng)性疲勞的發(fā)生有關(guān)；運(yùn)動(dòng)組表達(dá)量明顯上調(diào)的目標(biāo)蛋白質(zhì)，與長(zhǎng)期遞增運(yùn)動(dòng)負(fù)荷訓(xùn)練對(duì)組織細(xì)胞的損傷有關(guān)。值得一提的是，通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)方法成功篩選出的心房型心肌肌球蛋白輕鏈-1、谷草轉(zhuǎn)氨酶等蛋白質(zhì)，對(duì)機(jī)體可能產(chǎn)生的負(fù)面影響，在運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的研究尚未展開(kāi)，為研究運(yùn)動(dòng)性心臟疲勞提供了新的思路