TNF-α對(duì)COPD營(yíng)養(yǎng)不良大鼠模型呼吸肌蛋白質(zhì)分解代謝的影響.pdf

1、目的：建立COPD大鼠模型，觀察大鼠營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)和呼吸肌蛋白質(zhì)分解代謝率的變化，觀察血清TNF-a的變化及與營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的關(guān)系、呼吸肌組織TNF-a的變化及與呼吸肌蛋白質(zhì)分解代謝率的關(guān)系；對(duì)部分發(fā)生營(yíng)養(yǎng)不良的大鼠采用腫瘤壞死因子-a單克隆抗體(TNF-aMcAb)靜脈注射進(jìn)行干預(yù)，觀察上述指標(biāo)的變化，明確TNF-a是否對(duì)COPD模型大鼠的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)和呼吸肌蛋白質(zhì)分解代謝率有影響。 方法：將90只健康Wistar大鼠隨機(jī)分為模型組70只

2、，對(duì)照組20只。模型組采用氣管內(nèi)注入豬胰彈性蛋白酶(PPE)和熏香煙的方法建立COPD大鼠模型。對(duì)照組不熏香煙，在模型組氣管內(nèi)注入PPE的同一天采用同一術(shù)式在氣管內(nèi)注入等量注射用生理鹽水。模型制作成功后，以低于對(duì)照組大鼠平均體重的90％作為判斷發(fā)生營(yíng)養(yǎng)不良的標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)COPD大鼠模型組營(yíng)養(yǎng)不良發(fā)生率達(dá)到29％時(shí)，隨機(jī)抽取已發(fā)生營(yíng)養(yǎng)不良的大鼠10只，將動(dòng)物分為對(duì)照組、COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組、COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良非干預(yù)組和COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良

3、TNF-A McAb干預(yù)組。COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良TNF-A McAb干預(yù)組尾靜脈注射TNF-A McAb 0.1mg／Kg．Bw，其他組動(dòng)物在相同時(shí)間尾靜脈注射等量注射用生理鹽水，干預(yù)4天，繼續(xù)飼養(yǎng)10天后，處死全部大鼠，進(jìn)行如下指標(biāo)測(cè)定： 1)采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ElLISA)測(cè)定大鼠血清、呼吸肌勻漿TNF-a 含量。 2)使用自動(dòng)生化儀測(cè)定大鼠血漿葡萄糖、白蛋白、甘油三酯含量。 3)分離大鼠膈肌、肋間內(nèi)肌，

4、分別稱重，勻漿后取上清液，采用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定上清液中三甲基組氨酸(3-MH)、酪氨酸(Tyr)含量。 結(jié)果： 1)大鼠血清腫瘤壞死因子-α測(cè)定結(jié)果：COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良非干預(yù)組血清TNF-α含量明顯高于對(duì)照組(P<0.01)、COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組(P<0.01)和COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01)；COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組血清TNF-α含量明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。 2)血漿葡萄糖、

5、白蛋白、甘油三酯含量測(cè)定：COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良非干預(yù)組血漿葡萄糖、甘油三酯含量明顯高于對(duì)照組(P<0.01，P<0.01)、COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組(P<0.01，P<0.01)和COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01，P<0.01)；COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良非干預(yù)組血漿白蛋白含量明顯低于對(duì)照組(P<0.01)、COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組(P<0.01)和COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01)；COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組血漿葡萄糖、甘油三酯含量

6、明顯高于對(duì)照組(P<0.01，P<0.01)，COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組血漿白蛋白含量則明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。 3)大鼠呼吸肌腫瘤壞死因子-α測(cè)定結(jié)果：COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良非干預(yù)組呼吸肌勻漿TNF-α含量明顯高于對(duì)照組(P<0.01，P<0.01)、COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組(P<0.01，P<0.01)和COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01，P<0.01)；COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組呼吸肌勻漿TNF-Q含量明顯高于對(duì)照組(P

7、<0.01，P<0.01)。 4)大鼠膈肌稱重結(jié)果：COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良非干預(yù)組大鼠膈肌重量明顯低于對(duì)照組(P<0.01)、COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組(P<0.01)和COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01)；COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組膈肌重量明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。 5)大鼠膈肌、肋間內(nèi)肌勻漿中三甲基組氨酸(3-MH)、酪氨酸(Tyr)含量測(cè)定結(jié)果：COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良組大鼠膈肌、肋間內(nèi)肌勻漿中3-MH、Tyr含量均

8、明顯高于對(duì)照組(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)、COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)和COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)；COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組膈肌、肋間內(nèi)肌勻漿中3-MH、Tyr含量均明顯高于對(duì)照組(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)。 6)COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良TNF-α McAb干預(yù)組

9、干預(yù)后第十天，部分大鼠體重恢復(fù)到對(duì)照組平均體重的90％以上。血漿葡萄糖、白蛋白、甘油三酯與COPD營(yíng)養(yǎng)正常組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05，P>0.05，P>0.05)；膈肌重量與COPD營(yíng)養(yǎng)正常組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；膈肌、肋間內(nèi)肌3-MH、Tyr含量與COPD營(yíng)養(yǎng)正常組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05，P>0.05，P>0.05，P>0.05)。 結(jié)論：TNF-α參與了COPD大鼠模型營(yíng)養(yǎng)不良的發(fā)生。COPD大鼠模