適應(yīng)性離心運(yùn)動對大鼠腓腸肌蛋白質(zhì)組學(xué)的影響.pdf

1、目的：
　　通過蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)和方法，評價1周離心運(yùn)動及4周遞增負(fù)荷離心運(yùn)動前后蛋白質(zhì)的差異表達(dá)，較全面分析適應(yīng)性運(yùn)動對骨骼肌蛋白組的影響。
　　方法：
　　雄性SD大鼠，體重220-250g。按體重隨機(jī)分為4組：1周對照組(1C)，1周離心運(yùn)動組(E1W，-16°，16m/min，1h)，4周對照組(4C)，4周遞增負(fù)荷離心運(yùn)動組(E4W，第一周：-16°，16m/min，1h；第二周：-16°，20m/min，1h

2、；第三周：-16°，20m/min，90min；第四周：-16°，20m/min，120min)。戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，腹主動脈取血后迅速取腓腸肌，在液氮中研磨至粉末狀，三氯乙酸-丙酮沉淀過夜，加入蛋白裂解液(8 M urea，2M thiourea，4％ CHAPS，1 mM PMSF，50μg/ml leupeptin，10μg/ml pepstatin，50 mM DTT)。Bradford法測蛋白濃度，進(jìn)行等電聚焦，聚焦完成后

3、直接進(jìn)行SDS-PAGE（12%）電泳，銀染，掃描后用PDQuest軟件分析，對顯著變化的蛋白點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TOF-TOF質(zhì)譜鑒定。
　　結(jié)果：
　　肌纖維橫截面積在一周中等強(qiáng)度離心運(yùn)動以及四周遞增負(fù)荷離心運(yùn)動后12小時都發(fā)生肥大現(xiàn)象，肌纖維橫截面積增大。實(shí)驗(yàn)組和對照組各檢測出大約500個蛋白點(diǎn)。通過檢測和分析，離心運(yùn)動導(dǎo)致許多蛋白質(zhì)的豐度發(fā)生變化。一周離心運(yùn)動后，腓腸肌有199個蛋白點(diǎn)下調(diào)，182個蛋白點(diǎn)上調(diào)。在四周遞

4、增負(fù)荷離心運(yùn)動訓(xùn)練后，有159個蛋白點(diǎn)上調(diào)和203個蛋白點(diǎn)下調(diào)。這些蛋白質(zhì)涉及代謝、細(xì)胞結(jié)構(gòu)和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的變化。一周和四周離心運(yùn)動后，MHCI比例和含量顯著增加，而MHCIIx/b的比例和含量都有所下降。MHCIIb的含量在一周離心運(yùn)動中變化不大，但在四周遞增負(fù)荷離心運(yùn)動中顯著增加。
　　結(jié)論：
　　1）適應(yīng)性離心運(yùn)動后，肌纖維橫截面積增大，慢肌比例增多，并且有氧代謝相關(guān)蛋白含量增加。
　　2）適應(yīng)性過程中，結(jié)構(gòu)蛋白有明