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1、 本實(shí)驗(yàn)從楊盤二孢菌菌絲和濾液中獲得了兩種激發(fā)子粗提物。對(duì)它們處理?xiàng)顦渲羞^氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的誘導(dǎo)活性進(jìn)行了研究,以及對(duì)兩種激發(fā)子物質(zhì)的生物活性和穩(wěn)定性、及在不同植物過敏性反應(yīng)進(jìn)行了研究;最后對(duì)激發(fā)子物質(zhì)進(jìn)行了初步純化和分離。主要研究結(jié)果如下: (1)用乙醇沉淀法和細(xì)胞破壁法分別從楊盤二孢菌的培養(yǎng)濾液和菌絲中獲得兩種激發(fā)子粗提物,并用蒽酮法和考馬斯亮藍(lán)法分別測(cè)定其中糖和蛋白質(zhì)的含量,發(fā)現(xiàn)濾液激發(fā)子粗提物(
2、CFE)糖和蛋白的含量分別為41.07mg/ml和40mg/ml,而菌絲激發(fā)子粗提物(CME)糖和蛋白含量分別為48.07mg/ml和55mg/ml?! ?2)對(duì)兩種激發(fā)子的生物活性進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果表明:菌絲激發(fā)子粗提物在誘導(dǎo)煙草葉片產(chǎn)生過敏反應(yīng)的有效濃度處于8.01mg/ml至48.07mg/ml(葡萄糖當(dāng)量)之間,而濾液激發(fā)子粗提物誘導(dǎo)煙草葉片產(chǎn)生過敏反應(yīng)的有效濃度處于6.85mg/ml至41.07mg/ml(葡萄糖當(dāng)量)之間。
3、 (3)對(duì)煙草過敏性細(xì)胞死亡檢測(cè)結(jié)果表明,菌絲激發(fā)子粗提物處理在20h時(shí),處理部位細(xì)胞全部死亡;而濾液激發(fā)子粗提物處理在24h時(shí),處理部位細(xì)胞全部死亡?! ?4)濾液激發(fā)子粗提物對(duì)溫度不敏感而對(duì)堿性條件敏感,菌絲激發(fā)子粗提物對(duì)酸堿不敏感而對(duì)溫度敏感。濾液激發(fā)子粗提物對(duì)溫度不敏感的特性,將有利于對(duì)該激發(fā)子的開發(fā)和應(yīng)用。 (5)兩種激發(fā)子粗提物在分別用去針頭注射法處理煙草、辣椒和茄子葉片,24h后煙草上出現(xiàn)過敏性反應(yīng)。隨著時(shí)間延長(zhǎng),
4、煙草上過敏性斑擴(kuò)大,而辣椒和茄子上沒有任何反應(yīng)。表明這兩種激發(fā)子在誘導(dǎo)過敏反應(yīng)方面具有一定的選擇性?! ?6)用兩種激發(fā)子粗提液處理感病楊樹和抗病楊樹品種的葉片,發(fā)現(xiàn)抗病楊樹的酶活性變化較為明顯,說明兩種激發(fā)子均是?;约ぐl(fā)子?! ?5)用SephadexG-100柱層析的方法初步純化兩種激發(fā)子,并且將菌絲激發(fā)子粗提物過柱后得到兩個(gè)活性組分J14和J25;濾液激發(fā)子粗提物過柱后獲得兩個(gè)活性組分L9和L16。將4個(gè)組分進(jìn)行的煙草葉片過
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