小麥應(yīng)答激發(fā)子刺激或葉銹菌侵染誘發(fā)的HR過程中NO的功能初探.pdf

1、植物抵抗病原菌侵染過程中會(huì)發(fā)生一系列的復(fù)雜的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程,NO作為一種新型植物信號(hào)分子引起了人們的極大關(guān)注。本試驗(yàn)以感染葉銹菌的小麥葉片細(xì)胞間隙液IWF-260作為激發(fā)子,刺激小麥洛夫林10懸浮細(xì)胞,在小麥懸浮細(xì)胞和激發(fā)子組成的互作系統(tǒng)中探討懸浮細(xì)胞受激發(fā)子刺激引發(fā)的NO變化情況及其產(chǎn)生的可能分子機(jī)制。采用Gross試劑法及熒光分子探針DAF-2DA標(biāo)記法檢測(cè)胞內(nèi)NO的動(dòng)態(tài)變化。并借助藥物學(xué)試驗(yàn)探討Ca2+、H2O2和NO的關(guān)系。同

2、時(shí),對(duì)接種葉銹菌的小麥葉片,通過熒光分子探針DAF-2DA標(biāo)記法檢測(cè)接種后不同時(shí)間葉片內(nèi)NO的動(dòng)態(tài)變化,并輔以NR活性的測(cè)定進(jìn)一步探討小麥應(yīng)答葉銹菌侵染誘發(fā)的HR過程中的NO的變化規(guī)律。
　　 試驗(yàn)結(jié)果表明,IWF-260可以誘導(dǎo)小麥懸浮細(xì)胞產(chǎn)生NO,NOS途徑和NR途徑參與了此過程,且NR途徑為主要途徑。抑制NO產(chǎn)生的藥物能夠明顯降低由IWF-260刺激誘發(fā)的細(xì)胞死亡率,表明NO可能在IWF-260引起細(xì)胞死亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中

3、發(fā)揮重要作用；小麥葉片接種葉銹菌后,以熒光探針標(biāo)記跟蹤檢測(cè)NO動(dòng)態(tài)變化,表明小麥應(yīng)答葉銹菌侵染誘發(fā)HR過程中有NO的參與。綜合兩者結(jié)果表明,NO在小麥應(yīng)答激發(fā)子刺激或葉銹菌侵染誘發(fā)的HR過程中發(fā)揮重要作用。
　　 抑制胞外鈣離子內(nèi)流的藥物能夠明顯降低由IWF-260刺激誘發(fā)的NO含量及細(xì)胞死亡率,表明Ca2+與IWF-260誘發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生NO的過程密切相關(guān),且在由此引發(fā)的細(xì)胞死亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中發(fā)揮重要作用,同時(shí)我們推測(cè)Ca2+可