交沙霉素的分離純化工藝研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、交沙霉素(josamycin)是屬于十六元大環(huán)內(nèi)酯類抗生藥物,它是一種廣譜抗菌素,其抗菌譜與紅霉素相似,但是副作用較小且不易使病菌產(chǎn)生抗藥性。本課題的主要內(nèi)容是研究交沙霉素的分離提取和純化工藝。主要取得了一下成果: 首先,建立了關(guān)于交沙霉素的分析檢測方法,包括生物測定法和高效液相色譜法。其中高效液相色譜法具有快速、準確等特點,適用于測定發(fā)酵液及各個分離環(huán)節(jié)中的含量。通過改變流動相的比例,緩沖液的濃度和酸堿度,經(jīng)過優(yōu)化后的色譜條件

2、是:色譜柱用碳十八烷基硅膠鍵合柱;流動相是甲醇和磷酸緩沖液,其比例是80:20;檢測波長是232nm;流速是1ml/min;進樣量是10ul;柱溫是室溫。在上述條件下交沙霉素的保留時間為6.412min,與其他雜質(zhì)峰的分離度大于1.5。 在大孔樹脂吸附分離法的研究中,從幾種常用的大孔樹脂中篩選出了XAD-16樹脂為吸附劑,優(yōu)化后的吸附條件為:吸附流速為O.5ml/min;pH為10;加入1%的氯化鈉的鹽濃度。解吸的時用乙醇為解吸

3、劑,優(yōu)化后的洗脫條件:70%和100%兩種濃度的乙醇為洗脫劑,采用梯度洗脫的方式,先用70%的乙醇洗脫,大量的雜質(zhì)及色素被洗脫;然后用100%的乙醇將有效成分洗脫下來。 在溶媒萃取法提取的試驗中,由于交沙霉素在發(fā)酵液中大部分存在于菌絲體中,所以試驗中將發(fā)酵液調(diào)pH值到9,然后離心分離,將菌絲體與輕質(zhì)碳酸鈣粉末以質(zhì)量比為1:1的比例混合均勻,在真空干燥箱中50℃條件下干燥6小時。將干燥的菌絲體均勻粉碎大小顆粒為20目。干燥菌絲體顆

4、粒用95%浸提乙醇,通過設(shè)計正交試驗得到用95%乙醇浸提干燥菌絲體顆粒的最優(yōu)條件是:每10克干燥菌絲體用20毫升95%乙醇;浸提時間為36小時;浸提溫度為室溫;浸提次數(shù)為3次。 在交沙霉素的精制階段,用200-300目的層析硅膠裝柱,用氯仿:甲醇=2:3比例配制的洗脫液進行洗脫,收集洗脫液后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮(真空度為0.095Mpa,溫度為50℃)。濃縮液揮干后得到黃色粉末狀的交沙霉素,然后用pH3.5的酸化水溶解該粉末。將交

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