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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 采用單細(xì)胞染色體制備技術(shù),分析人類常規(guī)體外受精與胚胎移植中(in-vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)異常受精卵及異常受精卵來(lái)源胚胎的染色體組成。 方法: 加精后24~72小時(shí)收集異常受精卵75枚、異常受精卵來(lái)源的胚胎277枚,其中IVF來(lái)源的三原核(tripronuclear,3PN)受精卵71枚、2細(xì)胞胚胎38枚、>2細(xì)胞胚胎239枚,卵胞漿內(nèi)
2、單精子顯微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)來(lái)源的單原核(monopronucleus,1PN)胚胎4枚。分別與秋水仙素(終濃度0.10 ug/ml)共培養(yǎng)14~20小時(shí),Tyrode's液去除透明帶,胚胎需分散成卵裂球,0.9%枸櫞酸鈉液低滲20~30分鐘后梯度固定,胰酶顯帶、Giemsa染色,美國(guó)維士染色體核型自動(dòng)分析系統(tǒng)(Auto-System K)分析核型并照相。 結(jié)果:
3、 (1)IVF-3PN受精卵及胚胎的染色體制備:3PN受精卵的有絲分裂指數(shù)及染色體制備成功率最高,分別為67.6%(48/71)、52.1%(37/71)。2細(xì)胞胚胎的有絲分裂指數(shù)及染色體制備成功率分別為38.2%(29/76)、31.2%(24/76)。>2細(xì)胞胚胎的有絲分裂指數(shù)及染色體制備成功率最低,分別為16.2%(149/920)、8.2%(75/920)。 (2)3PN受精卵及胚胎的染色體組成:3PN受精卵的三倍
4、體率最高,為75.7%(28/37),2細(xì)胞胚胎為70.8%(17/24),>2細(xì)胞胚胎染色體核型紊亂,多為近二倍體(56%)、近單倍體(32%),三倍體率僅為9.3%(7/75)。 (3)ICSI-1PN胚胎的染色體組成:4枚ICSI-1PN胚胎分散后共獲29枚細(xì)胞,其中6細(xì)胞(來(lái)自于3枚胚胎)可染色體計(jì)數(shù),顯示均為單倍體(5細(xì)胞為23條染色體,1細(xì)胞為25條染色體)。 結(jié)論: (1)傳統(tǒng)染色體制備方法可對(duì)受精
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