奧瑞凝膠對反流性食管炎模型大鼠胃腸激素GAS、MTL的影響.pdf

1、目的:
　　本課題采用反流性食管炎(Reflux Esophagitis)模型大鼠,通過與西藥雷尼替丁對照,觀察中藥復方制劑奧瑞凝膠對反流性食管炎模型大鼠的治療作用及其對血清GAS和血漿MTL的影響,從而為奧瑞凝膠的研制和開發(fā)奠定基礎。
　　方法:
　　健康SD大鼠(河南動物實驗中心提供)84只,雌雄各半,適應性喂養(yǎng)1周后,稱重編號,隨機分為7組(雌雄各半),其中奧瑞凝膠按照給藥劑量的不同分為3組即高劑量組(2.1g/

2、100g)、中劑量組(1.05g/100g)、低劑量組(0.525g/100g),其余4組分別是陽性對照組(雷尼替丁0.035g/100g)、賦形劑對照組(不含藥凝膠劑)、模型組(雙蒸水)、假手術組(雙蒸水)。各組實驗動物術前禁食24h,但不禁水,用10％水合氯醛(3ml/kg)進行腹腔注射,麻醉后仰臥固定于鼠板上,行常規(guī)備皮及消毒鋪巾,從劍突下正中開腹,切口長度控制在3cm以內(nèi),逐層切開進入腹腔,充分暴露食管下段及胃食管交界區(qū),用止血

3、鉗平置于胃食管交接區(qū)域之下作為支撐,在胃食管交界區(qū)的右前壁作一長約1cm的縱行切口(食管側0.5cm,胃側0.5cm),同時避開血管和神經(jīng),完全切開胃食管交界區(qū)平滑肌,使胃粘膜及食管粘膜充分外露,然后在幽門與十二指腸交界近幽門處行幽門半結扎手術。假手術組只切開腹腔,將胃體取出暴露10分鐘,不行胃食管切開及幽門半結扎術。動物于術后12h進水,術后1～2天少量進食,術后3～4天恢復正常飲食。并于造模后第7天后開始灌胃給藥,各組均按0.5ml

4、/100g的體積給藥,每日1次,連續(xù)14天。末次給藥后禁食12h不禁水,用10%水合氯醛(3ml/kg)腹腔麻醉,將麻醉后的大鼠,固定于鼠板上,沿腹正中線開腹,切口長5～7cm,分離腹內(nèi)容物,找到主動脈,用5ml一次性注射器腹腔動脈取血4～5ml,然后迅速找到其胃體,在胃大彎處穿一小孔,將pH值自動記錄儀的pH電極從穿孔處插入胃內(nèi),并通過賁門進入食管,電極放置于胃食管交界點以上1cm食管粘膜處,1分鐘后讀取并記錄pH值。再迅速留取食管下

5、段及胃體組織,從幽門處沿胃大彎,剪開胃體至食管下段區(qū)域,生理鹽水沖洗干凈,肉眼觀察胃食管區(qū)域形態(tài)并記錄,留取自賁門上1cm處食管下段和胃小彎處部分組織,置入4%甲醛液固定,以作病理切片之用;所采5ml血液,分別用離心機分離血清血漿分別放入EP管中,–20°保存,然后用碘[125I]胃泌素(GAS)、胃動素(MTL)放射免疫分析試劑盒檢測并觀察各組大鼠血清GAS,血漿MTL的含量。
　　結果:
　　1.與假手術組比較:模型組及

6、賦形劑組大鼠食管下段粘膜pH值,血清GAS,血漿MTL的含量均有顯著降低(P<0.01),兩組的病理組織學呈中-重度改變(P<0.05),說明造模成功。
　　2.與模型組及賦形劑組比較:奧瑞凝膠高、中、低劑量組及雷尼替丁組,各用藥組大鼠食管下段粘膜pH值,血清GAS,血漿MTL的含量均有不同程度增高(P<0.01),各組食管粘膜的肉眼觀察情況和病理情況較輕(P<0.05),病理組織學改善明顯。
　　3.與雷尼替丁組相比:奧瑞

7、凝膠高劑量組大鼠的食管粘膜肉眼觀察情況和病理學組織的改變有顯著差異(P<0.05),奧瑞凝膠高劑量組、中劑量大鼠血漿MTL的含量與雷尼替丁組比較(P<0.01),有顯著差異,但奧瑞凝膠高劑量組、中劑量組和低劑量各組對血清GAS(P>0.01)和食管下段pH值的影響(P>0.01)與雷尼替丁組比較無明顯差異。
　　4.與低劑量組相比:奧瑞凝膠高、中劑量各組大鼠血漿MTL的含量增高(P<0.01),且奧瑞凝膠高、中劑量各組血漿MTL之

8、間有顯著性差異(P<0.01)。雷尼替丁組血漿MTL的含量與低劑量組比較無顯著性差異(P>0.01)。
　　結論:
　　1.采用不完全幽門結扎合并賁門肌切開術法制備反流性食管炎大鼠模型,結果顯示該造模方法模型效果好,成功率較高,病理改變接近于臨床,是一種較為理想的造模方法。
　　2.不含藥凝膠(空白凝膠)只是一種基質(zhì),對大鼠反流性食管炎無治療作用。
　　3.從各組大鼠的食管肉眼觀察情況和病理學組織改變情況來看,奧

9、瑞凝膠能有效改善反流性食管炎病理組織學變化,促進食管粘膜組織的修復,增強食管粘膜屏障功能,防止RE進一步加重,具有顯著的阻止RE發(fā)生與發(fā)展的作用。
　　4.奧瑞凝膠能有效升高體內(nèi)胃腸激素血清GAS,血漿MTL水平,提高胃腸動力,增強LES的抗反流屏障功能和食管下段對反流物的廓清能力,減輕或阻止胃內(nèi)容物的反流,這可能是其治療RE的重要機制之一。
　　5.從奧瑞凝膠高、中劑量各組大鼠的血漿MTL的水平來看,奧瑞凝膠防治RE的效果