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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
本課題采用反流性食管炎(Reflux Esophagitis)模型大鼠,通過(guò)與西藥雷尼替丁對(duì)照,觀察中藥復(fù)方制劑奧瑞凝膠對(duì)反流性食管炎模型大鼠的治療作用及其對(duì)血清GAS和血漿MTL的影響,從而為奧瑞凝膠的研制和開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
方法:
健康SD大鼠(河南動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供)84只,雌雄各半,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,稱重編號(hào),隨機(jī)分為7組(雌雄各半),其中奧瑞凝膠按照給藥劑量的不同分為3組即高劑量組(2.1g/
2、100g)、中劑量組(1.05g/100g)、低劑量組(0.525g/100g),其余4組分別是陽(yáng)性對(duì)照組(雷尼替丁0.035g/100g)、賦形劑對(duì)照組(不含藥凝膠劑)、模型組(雙蒸水)、假手術(shù)組(雙蒸水)。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)前禁食24h,但不禁水,用10%水合氯醛(3ml/kg)進(jìn)行腹腔注射,麻醉后仰臥固定于鼠板上,行常規(guī)備皮及消毒鋪巾,從劍突下正中開腹,切口長(zhǎng)度控制在3cm以內(nèi),逐層切開進(jìn)入腹腔,充分暴露食管下段及胃食管交界區(qū),用止血
3、鉗平置于胃食管交接區(qū)域之下作為支撐,在胃食管交界區(qū)的右前壁作一長(zhǎng)約1cm的縱行切口(食管側(cè)0.5cm,胃?jìng)?cè)0.5cm),同時(shí)避開血管和神經(jīng),完全切開胃食管交界區(qū)平滑肌,使胃粘膜及食管粘膜充分外露,然后在幽門與十二指腸交界近幽門處行幽門半結(jié)扎手術(shù)。假手術(shù)組只切開腹腔,將胃體取出暴露10分鐘,不行胃食管切開及幽門半結(jié)扎術(shù)。動(dòng)物于術(shù)后12h進(jìn)水,術(shù)后1~2天少量進(jìn)食,術(shù)后3~4天恢復(fù)正常飲食。并于造模后第7天后開始灌胃給藥,各組均按0.5ml
4、/100g的體積給藥,每日1次,連續(xù)14天。末次給藥后禁食12h不禁水,用10%水合氯醛(3ml/kg)腹腔麻醉,將麻醉后的大鼠,固定于鼠板上,沿腹正中線開腹,切口長(zhǎng)5~7cm,分離腹內(nèi)容物,找到主動(dòng)脈,用5ml一次性注射器腹腔動(dòng)脈取血4~5ml,然后迅速找到其胃體,在胃大彎處穿一小孔,將pH值自動(dòng)記錄儀的pH電極從穿孔處插入胃內(nèi),并通過(guò)賁門進(jìn)入食管,電極放置于胃食管交界點(diǎn)以上1cm食管粘膜處,1分鐘后讀取并記錄pH值。再迅速留取食管下
5、段及胃體組織,從幽門處沿胃大彎,剪開胃體至食管下段區(qū)域,生理鹽水沖洗干凈,肉眼觀察胃食管區(qū)域形態(tài)并記錄,留取自賁門上1cm處食管下段和胃小彎處部分組織,置入4%甲醛液固定,以作病理切片之用;所采5ml血液,分別用離心機(jī)分離血清血漿分別放入EP管中,–20°保存,然后用碘[125I]胃泌素(GAS)、胃動(dòng)素(MTL)放射免疫分析試劑盒檢測(cè)并觀察各組大鼠血清GAS,血漿MTL的含量。
結(jié)果:
1.與假手術(shù)組比較:模型組及
6、賦形劑組大鼠食管下段粘膜pH值,血清GAS,血漿MTL的含量均有顯著降低(P<0.01),兩組的病理組織學(xué)呈中-重度改變(P<0.05),說(shuō)明造模成功。
2.與模型組及賦形劑組比較:奧瑞凝膠高、中、低劑量組及雷尼替丁組,各用藥組大鼠食管下段粘膜pH值,血清GAS,血漿MTL的含量均有不同程度增高(P<0.01),各組食管粘膜的肉眼觀察情況和病理情況較輕(P<0.05),病理組織學(xué)改善明顯。
3.與雷尼替丁組相比:奧瑞
7、凝膠高劑量組大鼠的食管粘膜肉眼觀察情況和病理學(xué)組織的改變有顯著差異(P<0.05),奧瑞凝膠高劑量組、中劑量大鼠血漿MTL的含量與雷尼替丁組比較(P<0.01),有顯著差異,但奧瑞凝膠高劑量組、中劑量組和低劑量各組對(duì)血清GAS(P>0.01)和食管下段pH值的影響(P>0.01)與雷尼替丁組比較無(wú)明顯差異。
4.與低劑量組相比:奧瑞凝膠高、中劑量各組大鼠血漿MTL的含量增高(P<0.01),且奧瑞凝膠高、中劑量各組血漿MTL之
8、間有顯著性差異(P<0.01)。雷尼替丁組血漿MTL的含量與低劑量組比較無(wú)顯著性差異(P>0.01)。
結(jié)論:
1.采用不完全幽門結(jié)扎合并賁門肌切開術(shù)法制備反流性食管炎大鼠模型,結(jié)果顯示該造模方法模型效果好,成功率較高,病理改變接近于臨床,是一種較為理想的造模方法。
2.不含藥凝膠(空白凝膠)只是一種基質(zhì),對(duì)大鼠反流性食管炎無(wú)治療作用。
3.從各組大鼠的食管肉眼觀察情況和病理學(xué)組織改變情況來(lái)看,奧
9、瑞凝膠能有效改善反流性食管炎病理組織學(xué)變化,促進(jìn)食管粘膜組織的修復(fù),增強(qiáng)食管粘膜屏障功能,防止RE進(jìn)一步加重,具有顯著的阻止RE發(fā)生與發(fā)展的作用。
4.奧瑞凝膠能有效升高體內(nèi)胃腸激素血清GAS,血漿MTL水平,提高胃腸動(dòng)力,增強(qiáng)LES的抗反流屏障功能和食管下段對(duì)反流物的廓清能力,減輕或阻止胃內(nèi)容物的反流,這可能是其治療RE的重要機(jī)制之一。
5.從奧瑞凝膠高、中劑量各組大鼠的血漿MTL的水平來(lái)看,奧瑞凝膠防治RE的效果
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