黃芩素對(duì)大鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性的影響及其機(jī)制.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分、黃芩素對(duì)大鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性的影響 目的：黃芩素（Baicalein，BAI）是從黃芩的干燥根中提取的主要黃酮之一。以往研究表明BAI具有抗炎、抗病毒、抗氧化損傷等藥理作用，并能改善腦損傷引起的認(rèn)知障礙。已有報(bào)道黃酮類(lèi)天然化合物可提高動(dòng)物的認(rèn)知能力、增強(qiáng)LTP。但黃芩總黃酮的單體黃芩素是否可改善正常動(dòng)物的認(rèn)知能力，影響LTP 尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究旨在觀察BAI 對(duì)大鼠海馬腦片CA1 區(qū)長(zhǎng)

2、時(shí)程增強(qiáng)（Long-term potentiation，LTP）的影響，并進(jìn)一步探討其作用機(jī)制。 方法：急性分離大鼠海馬腦片，通過(guò)細(xì)胞外記錄海馬CA1區(qū)場(chǎng)電位的方法，觀察BAI 對(duì)海馬CA1 區(qū)基礎(chǔ)突觸傳遞、突觸前反應(yīng)、長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)的影響。 結(jié)果：低濃度BAI 不影響基礎(chǔ)突觸傳遞，高濃度（100 μmol/L）BAI顯著增強(qiáng)fEPSP的斜率和幅度。10 μmol/L BAI 顯著增強(qiáng)海馬CA1 區(qū)的LTP。10 μmol/

3、LBAI 作用腦片后，反映突觸前反應(yīng)的兩個(gè)指標(biāo)PPR和輸入-輸出反應(yīng)沒(méi)有顯著變化。N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受體阻斷劑APV 可完全阻斷BAI 易化LTP的作用；胞內(nèi)鈣離子螯合劑BAPTA-AM 可顯著抑制BAI 增強(qiáng)LTP的作用。L 型電壓依賴(lài)性鈣通道阻斷劑維拉帕米不能阻斷BAI 增強(qiáng)LTP的作用。 結(jié)論：BAI 能增強(qiáng)海馬CA1 區(qū)NMDA 受體依賴(lài)的LTP，且該作用是鈣離子依賴(lài)的。 第二部分、黃芩素對(duì)大鼠海

4、馬CA1 區(qū)突觸可塑性相關(guān)蛋白質(zhì)表達(dá)的影響 目的：神經(jīng)顆粒素（Ng）是神經(jīng)元內(nèi)與鈣調(diào)蛋白（CaM）結(jié)合的一種蛋白質(zhì)，其主要作用是調(diào)節(jié)Ca2+和鈣/鈣調(diào)蛋白（Ca2+/CaM）介導(dǎo)的信號(hào)通路。鈣/鈣調(diào)蛋白依賴(lài)性蛋白激酶Ⅱ（CaMKII）是腦內(nèi)Ca2+/CaM 依賴(lài)的激酶之一，調(diào)節(jié)神經(jīng)元的很多功能，與學(xué)習(xí)記憶密切相關(guān)。CaMKII 第286 位蘇氨酸有一個(gè)自身磷酸化位點(diǎn)，通過(guò)自身磷酸化CaMKII 可介導(dǎo)短暫胞內(nèi)鈣離子濃度（[Ca2

5、+]I）升高觸發(fā)的某些生理功能的長(zhǎng)時(shí)程改變。已知CaMKII 是NMDA 受體依賴(lài)的LTP 所必需的。本研究旨在觀察Ng、CaMKII 在BAI 易化LTP的過(guò)程中的作用，進(jìn)一步探討B(tài)AI 增強(qiáng)LTP的機(jī)制。 方法：利用western blot方法，場(chǎng)電位記錄結(jié)束后提取CA1區(qū)蛋白質(zhì)，觀察BAI 對(duì)海馬腦片CA1 區(qū)CaMKⅡ，pCaMKⅡ，Ng，pNg表達(dá)的影響。 結(jié)果：高頻刺激（HFS）可增加腦片pCaMKⅡ和pNg