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文檔簡介
1、[目的]
觀察二氧化碳(CO2)氣腹對人卵巢漿液性乳頭狀囊腺癌細胞株(SKOV-3)在裸鼠體內(nèi)生長增殖及所形成的卵巢癌移植瘤組織中轉(zhuǎn)移抑制基因(nm23-H1)和基質(zhì)金屬蛋白酶-2基因(MMP-2)表達的影響,并分析二者之間的相關性,以期探討CO2氣腹對腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的影響及其機制,為臨床上腔鏡手術用于治療卵巢惡性腫瘤提供實驗依據(jù)。
[方法]
采用腹腔注射卵巢癌細胞株SKOV-3建立裸鼠卵巢癌腹
2、腔移植瘤模型,隨機分為四組,每組10只裸鼠:單純麻醉對照組(僅麻醉,手術時間30min)、開腹手術組(麻醉后開腹,手術持續(xù)30min)、CO2氣腹0.5h組(麻醉后建立CO2氣腹持續(xù)時間為30min)、CO2氣腹1h組(麻醉后建立CO2氣腹持續(xù)時間為60min),術后飼養(yǎng)12周,處死裸鼠,首先觀察四組裸鼠腹腔腫瘤生長情況,然后收集腫瘤組織,采用實時熒光定量PCR(real-time PCR)和免疫組化SP法檢測癌組織中nm23-H1和M
3、MP-2的mRNA和蛋白表達情況。實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差((x)±s)表示,采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計學分析,各組間腫瘤生長情況與基因表達情況采用卡方檢驗、單因素方差分析(One-way ANOVA),兩兩比較采用LSD進行多重檢驗;相關性分析采用Spearman秩相關分析和Pearson積差相關分析方法。
[結果]
①裸鼠腹腔腫瘤重量:開腹組與對照組腹腔腫瘤平均重量沒有明顯差異(P>0.05),但CO
4、2氣腹0.5h組和1h組明顯高于開腹組或?qū)φ战M,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
②nm23-H1和MMP-2蛋白表達結果:對照組和開腹組nm23-H1和MMP-2的陽性表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05);CO2氣腹組nm23-H1的陽性率均低于對照組,而MMP-2的陽性率均高于對照組,且差異都有統(tǒng)計學意義(P<0.05);開腹組與CO2氣腹0.5h組nm23-H1和MMP-2的表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05),但與CO
5、2氣腹1h組nm23-H1和MMP-2的表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);CO2氣腹不同時間nm23-H1和MMP-2的表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05);另外,nm23-H1和MMP-2的蛋白表達水平成負相關(r=-0.445,P<0.01)。
③nm23-H1和MMP-2的mRNA表達結果:對照組和開腹組nm23-H1和MMP-2的表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05),CO2氣腹組nm23-H1的表達明顯低于對照組和開腹
6、組,而MMP-2的表達明顯高于對照組和開腹組,且差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。CO2氣腹不同時間的兩組nm23-H1和MMP-2的表達有顯著性統(tǒng)計學差異(P<0.01)。另外,nm23-H1和MMP-2的mRNA表達水平具有相關性,成負相關(r=-0.984,P<0.05)。
[結論]
①CO2氣腹對人卵巢癌SKOV-3細胞的生長增殖有促進作用,且腫瘤的增殖與CO2氣腹作用時間相關。
②C
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