川芎嗪對哮喘大鼠Th1-Th2細胞因子的影響及機制研究.pdf

1、支氣管哮喘是氣道慢性炎癥性疾病，嗜酸性粒細胞、T淋巴細胞、肥大細胞等多種炎癥細胞和細胞因子參與這個病理過程。研究顯示，哮喘患者和動物模型的氣道炎癥與Th2型細胞因子產(chǎn)生增多和Th1細胞因子產(chǎn)生減少有關。Th2細胞可使IgE產(chǎn)生、肥大細胞增生、嗜酸性粒細胞浸潤而決定哮喘的嚴重程度，因此，哮喘被認為是Th2細胞驅動的疾病。初始（naive）CD4+T分化為Th1或 Th2細胞是免疫應答的關鍵過程。研究表明，T-bet和 GATA-3是決定

2、Th1和 Th2細胞分化的關鍵性轉錄因子。糖皮質激素是目前治療哮喘氣道炎癥最有效的藥物，但長期應用會產(chǎn)生明顯副作用。川芎嗪是中藥川芎根莖中分離出的生物堿，化學名為2，3，5，6-四甲基吡嗪。川芎嗪具有廣泛的藥理作用，如調節(jié)免疫、抗血小板聚集、抗氧化、抗炎、抗纖維化和抗腫瘤等，已廣泛應用于心腦血管系統(tǒng)疾病的治療；在哮喘治療方面的應用也早有報道，臨床研究證實川芎嗪治療哮喘效果確切。有研究顯示川芎嗪能抑制哮喘大鼠的氣道炎癥，但其機制尚不清楚。

3、因此，研究川芎嗪對哮喘氣道炎癥的影響及相關機制，探討其是否能調節(jié)Th細胞的分化，如何調節(jié)，將為其在哮喘防治中的臨床應用提供實驗依據(jù)。 第一部分、川芎嗪對哮喘大鼠氣道炎癥的影響 目的: 探討川芎嗪對哮喘大鼠氣道炎癥的影響。 方法: 40只SD大鼠隨機分為正常對照組（Con組），哮喘模型組（Ast組），哮喘生理鹽水組（Ast-C組），地塞米松組（Dex組），川芎嗪組（Lig組），每組8只。檢測肺泡灌洗

4、液（BALF）中的細胞成分，用蘇木素-伊紅（HE）染色觀察肺組織病理學變化。 結果: （1）Ast組及Ast-C組大鼠BALF中白細胞總數(shù)，嗜酸性粒細胞（EOS）和中性粒細胞（N）占總白細胞的百分比均高于Con組（P<0.05）；而Lig組BALF中細胞總數(shù)、EOS％和N％均低于Ast組及Ast-C組（P<0.05），但仍高于 Con組（P<0.05）；Dex組細胞總數(shù)、EOS％、N％和淋巴細胞占總白細胞的百分比（L％）

5、均低于Ast組及Ast-C組（P<0.05）。 （2）與Con組相比，Ast組及Ast-C組大鼠支氣管平滑肌肥厚，黏膜充血水腫，并有大量炎癥細胞浸潤，管腔內充滿大量黏液，有黏液栓形成，支氣管壁周圍有炎癥細胞浸潤。而Lig組和Dex組大鼠支氣管炎癥性改變則明顯減輕，支氣管壁周圍僅有少量炎癥細胞浸潤。 結論: 腹腔注射川芎嗪可抑制卵清蛋白誘導的大鼠氣道炎癥。 第二部分、川芎嗪對哮喘大鼠Th1/Th2細胞因子的

6、影響及機制 目的: 探討腹腔注射川芎嗪對哮喘大鼠Th1/Th2細胞因子的影響及機制。 方法: 40只SD大鼠隨機分為正常對照組（Con組），哮喘模型組（Ast組），哮喘生理鹽水組（Ast-C組），地塞米松組（Dex組），川芎嗪組（Lig組），每組8只。應用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）檢測各組大鼠BALF中 IL-4和IFN-γ的濃度，用免疫組化方法和Westerm blot方法檢測肺組織GATA-3和T

7、-bet蛋白的表達。 結果: （1）與Con組相比，Ast組及Ast-C組BALF中IL-4和肺組織GATA-3水平明顯升高（P<0.05），IFN-γ和T-bet水平明顯減低（P<0.05），IL-4/IFN-γ比值增大（P<0.05）； （2）與Ast及Ast-C組相比，Lig組BALF中IL-4和肺組織GATA-3水平明顯降低（P<0.05），IFN-γ和T-bet水平明顯升高（P<0.05），IL-4/I

8、FN-γ比值減?。≒<0.05），而Dex組IL-4、IFN-γ、GATA-3、T-bet水平和IL-4/IFN-γ比值均降低（P<0.05），IL-4和GATA-3分別比IFN-γ和T-bet減低更明顯。 （3）相關分析表明，Ast組肺組織GATA-3蛋白表達與BALF中IL-4濃度呈正相關（r＝0.86，P<0.05），T-bet與IFN-γ正相關（r＝0.82，P<0.05）。 結論: 川芎嗪可通過使哮喘肺