利用毛細(xì)管電泳技術(shù)檢測豬親本與其子代DNA甲基化差異及遺傳背景研究.pdf

1、DNA甲基化作為一種重要的表觀遺傳修飾，在維持正常細(xì)胞功能、遺傳印記、胚胎發(fā)育以及人類腫瘤發(fā)生中起著重要作用，是目前新的研究熱點(diǎn)之一。隨著對甲基化研究的不斷深入，各種各樣甲基化檢測方法被開發(fā)出來以滿足不同類型研究的要求。毛細(xì)管電泳是近年來迅速發(fā)展起來的一種分離分析技術(shù)，并成功地用于基因分析。本研究通過甲基化敏感的單鏈構(gòu)象分析法與毛細(xì)管電泳技術(shù)相結(jié)合建立一種高效、靈敏、自動(dòng)化的DNA甲基化檢測方法。 本研究以三個(gè)純種親本大白豬、長

2、白豬和梅山豬及其正反交大白豬×長白豬、長白豬×大白豬、大白豬×梅山豬和梅山豬×大白豬雜交豬為試驗(yàn)對象，應(yīng)用單鏈構(gòu)象多態(tài)性.毛細(xì)管電泳分析方法檢測肌肉組織IGF2第二啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)，從不同雜交組合角度，比較了親本與子代之間在啟動(dòng)子甲基化水平上的差異，并進(jìn)一步結(jié)合生產(chǎn)性狀資料進(jìn)行了相關(guān)分析。獲得的主要結(jié)果如下： 1.建立了檢測基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)的單鏈構(gòu)象多態(tài)性.毛細(xì)管電泳分析方法。 2.利用上述基于毛細(xì)管電泳的基因甲基化

3、分析平臺，測定了IGF2第二啟動(dòng)子與MYF5啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)。 3.肌肉組織中，IGF2基因第二啟動(dòng)子發(fā)生甲基化的比率表現(xiàn)為雜種豬均低’于純種豬。 4.對不同品種間IGF2啟動(dòng)子甲基化水平的差異進(jìn)行了比較，長白豬與其他六個(gè)豬種之間差異達(dá)到極顯著水平(p<0.01)。梅山豬與大梅豬之間差異達(dá)到顯著水平(p<0.05)。 5.利用SAS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，對IGF2啟動(dòng)子甲基化水平與生產(chǎn)性狀資料進(jìn)行了關(guān)聯(lián)分析：在65頭大白

4、、長白及其雜種豬中，IGF2啟動(dòng)子甲基化水平對一系列背膘厚性狀、眼肌高、眼肌面積、肥肉率、瘦肉率相關(guān)性差異顯著(p<0.05)或極顯著(p<0.01)。對于肉質(zhì)性狀，IGF2啟動(dòng)子甲基化水平與性狀的相關(guān)性不明顯。 6.在120頭梅山及梅大、大梅雜種豬中，IGF2啟動(dòng)子甲基化水平與眼肌高、眼肌面積相關(guān)性差異顯著(p<0.05)或極顯著(p<0.01)。對于肉質(zhì)性狀，IGF2啟動(dòng)子甲基化水平與背最長肌含水量相關(guān)性差異顯著(p<0.0