結腸癌腫瘤干細胞的初步研究.pdf

1、目的：檢測結腸癌細胞系SW-620中是否存在SP細胞(side population cells)，若存在則測定其比例，使SP細胞中尋找結腸癌腫瘤干細胞成為可能；利用流式細胞儀檢測結腸癌細胞系SW-620中是否存在CD133+的細胞亞群，若存在則使用免疫磁珠篩選CD133+的細胞亞群，再通過流式細胞儀檢測經(jīng)免疫磁珠篩選后陽性與陰性細胞之中的CD133+細胞比例的變化，探討使用免疫磁珠篩選CD133+細胞在結腸癌腫瘤干細胞研究中的可行性。

2、 方法：本研究第一部分是在結腸癌細胞系SW-620細胞懸液加入Hoechst 33342和PI，然后在對照組加入維拉帕米，然后上流式細胞儀檢測SP細胞的表達，檢測結腸癌細胞系SW-620中SP細胞比例。第二部分是利用流式細胞儀檢測結腸癌細胞系SW-620中是否存在CD133+的細胞亞群，若存在則使用免疫磁珠篩選CD133+的細胞亞群，再通過流式細胞儀檢測經(jīng)免疫磁珠篩選后陽性與陰性細胞之中的CD133+細胞比例。 結果：（

3、一）結腸癌細胞系SW-620中存在SP細胞，所占比例為0.1～1.0％。（二）結腸癌細胞株SW-620中CD133+細胞所占比例為55.16％左右。經(jīng)免疫磁珠篩選后，CD133陽性細胞群體中CD133+細胞所占的比例為75.60±6.89％，CD133陰性細胞群體中CD133+細胞所占的比例為33.40±3.74％。 結論：（一）人結腸癌細胞系SW-620中確實有SP細胞存在，從SP細胞中尋找結腸癌腫瘤干細胞的研究方法是可行的。