TSP1在前囊膜下白內(nèi)障形成中的作用.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
　　研究凝血酶敏感蛋白-1(TSP1)作用于體外培養(yǎng)的人晶體上皮細(xì)胞和猴晶狀體,通過(guò)觀察人晶體上皮細(xì)胞和猴晶狀體組織形態(tài)學(xué)的變化,檢測(cè)TSP1是否可誘導(dǎo)前囊膜下白內(nèi)障(ASC)的形成;
　　研究方法:
　　用大腸桿菌原核表達(dá)載體pGEX4T-1與TSP-1表達(dá)融合蛋白,通過(guò)親和層析分離純化后,將目的蛋白TSP-1作用于體外培養(yǎng)的猴晶狀體;另外,通過(guò)腺病毒(Advenovirus)載體包裝TSP-1作用于體外培養(yǎng)

2、的人晶體上皮細(xì)胞,同時(shí)可購(gòu)買TSP1蛋白直接作用于體外培養(yǎng)的猴晶狀體,觀察猴晶狀體組織形態(tài)學(xué)變化。
　　結(jié)果:
　　用大腸桿菌原核表達(dá)pGEX4T-1-TSP1融合蛋白,通過(guò)親和層析分離純化,Western blot顯示未得到預(yù)期154kD大小的條帶,說(shuō)明TSP1不適合于原核表達(dá);腺病毒和腺病毒包裝的TSP1作用于體外培養(yǎng)的人晶體上皮細(xì)胞,可使細(xì)胞形態(tài)發(fā)生纖維化及細(xì)胞間空隙增大,但腺病毒TSP1的致纖維化程度大些;與對(duì)照猴晶

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