SRC-3基因在脂肪生成和肥胖發(fā)生中的角色及其機(jī)制研究.pdf

1、類固醇激素受體協(xié)同因子-3(SRC-3)基因敲除小鼠體型明顯瘦小,體內(nèi)白色脂肪減少;病理顯示白色脂肪細(xì)胞小,呈分化不良的趨勢(shì).體內(nèi)棕色脂肪與體重之比雖較野生型無明顯差異,但在對(duì)小鼠棕色脂肪的電鏡觀察中發(fā)現(xiàn),SRC-3基因敲除小鼠的棕色脂肪細(xì)胞中線粒體大量增加,脂滴體積縮小,數(shù)目減少.進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)SRC-3(-/-)小鼠的棕色脂肪與白色脂肪中的UCPl的過度表達(dá),PGC-1α也相對(duì)增高.可見,SRC-3(-/-)脂肪分解與消耗增加,說明

2、了SRC-3具有抑制脂肪分解與消耗的作用,參與對(duì)細(xì)胞的功能調(diào)控.SRC-3基因敲除小鼠是一種脂肪營(yíng)養(yǎng)障礙或脂肪萎縮的小鼠模型. 我們從SRC-3幼鼠的白色脂肪組織中取出脂肪細(xì)胞前體(成纖維細(xì)胞)做原代培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)SRC-3基因敲除小鼠的脂肪前體細(xì)胞增殖快(<'3>H與流式結(jié)果),但分化成熟出現(xiàn)脂滴少.而從SRC-3幼鼠的棕色脂肪組織中取出脂肪細(xì)胞前體(成纖維細(xì)胞)做原代培養(yǎng),則沒有這個(gè)現(xiàn)象,SRC-3基因敲除小鼠與野生型小鼠棕色脂

3、肪前體細(xì)胞分化成熟出現(xiàn)脂滴一樣多. 我們發(fā)現(xiàn)在SRC-3基因敲除小鼠的脂肪中, 雖然PPARs(a、β、γ)及C/EBP α等的轉(zhuǎn)錄表達(dá)都增高(realtime PCR結(jié)果),但在白色脂肪中,PPARY蛋白質(zhì)水平明顯降低(Western Blot),導(dǎo)致白色脂肪細(xì)胞前體(成纖維細(xì)胞)向成熟脂肪細(xì)胞分化的減少,致使白色脂肪減少.而在棕色脂肪中,PPARγ蛋白質(zhì)的量變化不大,故無分化問題.同時(shí)PPAR α、B等在SRC-3基因敲除小

4、鼠的脂肪中表達(dá)增加,小鼠的白色脂肪的脂肪分解速度增加,運(yùn)向棕色脂肪中的線粒體,通過增加的UCPl來產(chǎn)熱消耗. 由此我們得出:PPAR γ的下調(diào),引起白色脂肪細(xì)胞的分化下降;PPAR α等的上調(diào),導(dǎo)致脂肪消耗增加.最終使SRC-3基因敲除小鼠的脂肪(尤其是白色脂肪)減少. SRC-3基因敲除后,在小鼠白色脂肪中,PPAR γ轉(zhuǎn)錄水平上升,而蛋白水平明顯下降.我們的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)有miRNA參與,抑制了PPAR γ蛋白質(zhì)的形成.并

5、通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)miR-27a在SRC-3基因敲除小鼠的白色脂肪中上升6倍,而在BAT中無明顯差異.miRNA是連接SRC-3與PPAR γ等參與脂肪生成與代謝調(diào)控的轉(zhuǎn)錄因子之間的樞紐. 結(jié)論： 根據(jù)SRC-3(-/-)小鼠的表型及已有的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,結(jié)合其他資料我們得出這樣的結(jié)論:PPAR γ的表達(dá)需SRC-3等基因的參與,SRC-3基因敲除以后,SRC-1、SRC-2基因代償增加, 所以PPAR γ的轉(zhuǎn)錄水平并無明顯下降;