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文檔簡介
1、 本文首先研究APAF-1在喉癌中的表達、缺失及啟動子甲基化情況,探討它與喉鱗癌發(fā)生的相關(guān)性。方法是應(yīng)用半定量RT-PCR方法、免疫組化分析Apaf-1表達,雜合性丟失(LOH)分析喉鱗癌病人APAF-1基因所在的12q22-23區(qū)域缺失情況,并用甲基化特異性PCR對該基因啟動子區(qū)甲基化情況進行研究。結(jié)果顯示:首次證實APAF-1與喉鱗癌相關(guān),在喉鱗癌中APAF-1表達下調(diào)。且啟動子甲基化是喉鱗癌APAF-1基因表達下調(diào)的主要原因。
2、 然后研究S100A8基因與喉癌發(fā)生的關(guān)系,以揭示炎癥在喉癌發(fā)生中的作用。 方法:RT-PCR檢測S100A8、BCL-2基因表達(方法同第一部分)。Western Blot檢測S100A8蛋白表達;免疫組化染色分析喉鱗癌組織中S100A8蛋白表達(方法同第一部分);RNAi方法研究S100A8基因?qū)ep2細胞影響;Transwell檢測細胞體外侵襲力,軟瓊脂集落形成實驗檢測Hep2細胞的致瘤性;TUNEL和流式細胞儀檢測細胞凋
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