二氧化氯對杭白菜采后軟腐病的抑制效果及其貯藏品質(zhì)的研究.pdf

1、以杭白菜軟腐病果膠桿菌（pectobacterium）為供試菌，分別采用二氧化氯氣體與液體兩種方式在離體條件下對果膠桿菌進行處理。用LB液體培養(yǎng)基進行搖床培養(yǎng)，并測定其在600 nm波長下的吸光度值，繪制果膠桿菌生長曲線；通過對果膠桿菌進行LB平板培養(yǎng)，觀察并記錄其存活率；采用處理后的果膠桿菌，分別測定二氧化氯處理對果膠桿菌細胞膜透性以及細胞滲出可溶性蛋白質(zhì)含量的影響；采用細胞壁降解酶誘導培養(yǎng)基對果膠桿菌進行搖床培養(yǎng)，研究不同處理方式以

2、及不同濃度的二氧化氯抑菌活性以及相關(guān)機理的研究；通過活體接種實驗，研究二氧化氯對果膠桿菌致病力的影響；經(jīng)過二氧化氯處理的杭白菜，貯藏期間發(fā)病情況及貯藏品質(zhì)研究。研究結(jié)果如下：
　　1、二氧化氯處理可顯著抑制果膠桿菌的生長速度，降低存活率，使果膠桿菌的細胞膜透性增大，細胞滲出的可溶性蛋白質(zhì)含量增加，且處理效果與濃度呈正相關(guān)。采用LB液體培養(yǎng)基培養(yǎng)20 h后，1.50 mg/L二氧化氯氣體處理的細菌濃度最小，抑制率為70.10％，1.

3、00 mg/L二氧化氯液體處理的抑制率為66.6%。其中，采用1.50 mg/L二氧化氯氣體處理對果膠桿菌的抑制效果最好，存活率為11.96%。二氧化氯處理的濃度越高，果膠桿菌的細胞膜透性增大，膜滲透率升高，細菌細胞膜滲透率的變化主要在前30 min，30 min以后對照組、0.25 mg/L、0.5 mg/L、0.75 mg/L處理組的細菌細胞膜滲透率趨于穩(wěn)定。而1.00 mg/L處理組的細胞膜滲透率繼續(xù)增加，于120 min后趨于穩(wěn)

4、定。采用考馬斯亮藍染色法測定果膠桿菌的細胞滲出可溶性蛋白含量，發(fā)現(xiàn)其可溶性蛋白含量與二氧化氯處理濃度呈正相關(guān)，其中，1.50 mg/L氣體處理、1.00 mg/L液體處理的可溶性蛋白含量與對照組有極顯著性差異（P<0.01），表明二氧化氯處理能夠作用于果膠桿菌的細胞膜，破壞其選擇滲透性，影響細胞內(nèi)外的物質(zhì)交換，使細胞內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)滲漏，從而抑制其生長。
　　2、二氧化氯處理能夠抑制人工接種果膠桿菌的杭白菜莖段的發(fā)病情況，抑制病斑直徑，

5、降低發(fā)病率。在接種后20 h，對照組的杭白菜莖段已全部發(fā)病，0.14 mg/L、0.57 mg/L、1.00 mg/L和1.50 mg/L處理組的病情指數(shù)分別為45%、25%、15%、5%。另一方面，二氧化氯處理能夠有效抑制果膠桿菌的細胞壁降解酶活性，二氧化氯氣體處理后的果膠酶、聚甲基半乳糖醛酸酶、羧甲基纖維素酶和β-葡萄糖苷酶活性峰值比二氧化氯液體處理的峰值延遲一天。實驗研究發(fā)現(xiàn)，果膠酶系活性較纖維素酶系的活性高，且峰值出現(xiàn)較早，說明

6、果膠酶是果膠桿菌侵染杭白菜的主要致病酶。
　　3、杭白菜為綠葉蔬菜，采用二氧化氯液體處理會導致水分殘留，給后續(xù)貯藏造成較嚴重影響，所以，實驗采用二氧化氯氣體處理，研究其對杭白菜貯藏品質(zhì)的影響，首先取濃度為1.01 mg/mL、4.03 mg/mL和7.02 mg/mL的二氧化氯溶液各10.00 mL，分別噴灑于三個70.00 L的密閉保鮮箱中，迅速放入5.00 kg杭白菜，密閉處理30 min，實驗最終的二氧化氯氣體濃度為0.14

7、 mg/mL、0.57 mg/mL和1.00 mg/L，以蒸餾水作對照。二氧化氯處理后，置于2±1℃、濕度85.00-95.00%冷庫中貯藏，同時測定其貯藏過程中生理生化指標的變化規(guī)律。實驗發(fā)現(xiàn)，0.57 mg/L的二氧化氯處理杭白菜30 min是本實驗中的最佳處理組，該處理條件對杭白菜的失水有明顯的抑制作用；可有效延緩可溶性固形物、葉綠素和維生素 C含量的降低；減輕細胞膜脂過氧化作用；抑制多酚氧化酶（PPO）與過氧化物酶（POD）活性