聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒載P16a基因的制備及在喉癌細(xì)胞中的表達(dá).pdf

1、目的：制備攜帶P16a基因的聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒并在喉癌細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)。
　　 方法：選用乳化聚合法制備聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒(PBCANPs)，以激光粒度分析儀及透射電子顯微鏡分析納米粒的形態(tài)和粒徑。用陽離子表面活性劑十六烷基三乙基溴化銨(CTAB)對納米粒進(jìn)行表面修飾。構(gòu)建真核表達(dá)載體pIRES2-EGFP-P16a經(jīng)過酶切鑒定及測序后與PBCA-NPs連接，轉(zhuǎn)染喉癌細(xì)胞Hep-2，熒光顯微鏡檢測轉(zhuǎn)染效率，蛋白印跡法檢

2、驗(yàn)P16a基因的表達(dá)，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率。
　　 結(jié)果：所制PBCA-NPs粒徑均勻、Zeta電位較高，較為理想；重組質(zhì)粒pIRES2-EGFP-P16a經(jīng)過酶切鑒定及測序后，表明真核表達(dá)載體構(gòu)建正確；PBCA-NPs可以介導(dǎo)pIRES2-EGFP-P16a高效轉(zhuǎn)染喉癌細(xì)胞，蛋白印跡檢測表明轉(zhuǎn)染后喉癌細(xì)胞能夠表達(dá)外源P16a基因，外源P16a基因的表達(dá)能有效抑制喉癌細(xì)胞的惡性增殖并能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
　　 結(jié)論：聚氰