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文檔簡介
1、葉綠素、番茄紅素、染料木素是膳食成分中較常見的幾種天然植物化學(xué)物。由于其具有多種生物學(xué)活性,現(xiàn)已大量用于藥品、保健食品開發(fā)。有研究提示這幾種物質(zhì)可能具有一定的抗誘變活性。本研究的目的是用人的類淋巴母細(xì)胞TK6的TK基因突變試驗和彗星試驗評價這幾種植物化學(xué)物的抗誘變性,一方面為其進一步的開發(fā)利用提供毒理學(xué)依據(jù),并為TK基因突變試驗在藥品、保健食品原料安全性評價中的推廣應(yīng)用積累資料;另一方面探討TK基因突變試驗用于抗誘變性評價的可能,以拓展
2、TK基因突變試驗的應(yīng)用范圍。 在TK基因突變試驗中,不加S9的情況下,分別以lO、20、40、80iμg/ml的葉綠素,5、10、20、40μg/ml的番茄紅素和0.625、1.25、2.5、5μg/ml的染料木素與陽性致突變物絲裂霉素C(MMC)同時處理TK6細(xì)胞3h,采用微孔板法進行細(xì)胞毒性、平板接種效率和突變頻率測定。結(jié)果顯示,隨受試物劑量的增加,葉綠素和番茄紅素對誘變性的拮抗作用增大,當(dāng)葉綠素劑量達(dá)到40μg/ml以上、
3、番茄紅素劑量達(dá)到20μg/ml以上時,TK位點的總突變頻率與MMC對照組比較有顯著性降低(P<0.05),而染料木素僅在0.625μg/ml的劑量時可明顯降低MMC誘導(dǎo)的。TK6細(xì)胞tl位點突變頻率。 在彗星試驗中,分別以10、20、40、80μg/ml葉綠素,5、10、20、40μg/ml番茄紅素和0.625、1.25、2.5、5μg/ml染料木素與陽性致突變物重鉻酸鉀(K<,2>Cr<,2>0<,7>)同時處理TK6細(xì)胞1h
4、,在葉綠素達(dá)到80μg/ml和番茄紅素達(dá)到20μg/ml時,TK6細(xì)胞的拖尾率和拖尾細(xì)胞尾長與抗誘變陽性對照組比較無顯著性差異(P>0.05),而與K<,2>Cr<,2>0<,7>對照組比較有顯著性差異(P<0.05),表明在此劑量下葉綠素和番茄紅素能抑制K<,2>Cr<,2>0<,7>誘導(dǎo)的。tK6細(xì)胞DNA單鏈斷裂,有明顯的抗誘變作用。在染料木素各劑量組均未見TK6細(xì)胞的拖尾率和拖尾細(xì)胞尾長與K<,2>Cr<,2>0<,7>組相比有
5、顯著性差異,表明染料木素在本試驗條件下無明顯的抑制K<,2>Cr<,2>O<,7>誘導(dǎo)TK6細(xì)胞DNA單鏈斷裂的作用。 本研究表明,在同時處理方式下,較大劑量的葉綠素、番茄紅素有明顯的抗MMC誘導(dǎo)的tk基因突變的作用,即可明顯降低MMC誘導(dǎo)的TK6細(xì)胞tk位點突變頻率。低劑量的染料木素能否拮抗MMC對TK6細(xì)胞的致突變作用,還有待進一步研究。TK基因突變試驗對這三種植物化學(xué)物抗誘變性的成功檢測,提示該試驗在抗誘變研究領(lǐng)域有較好的
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