野生高燕麥草耐鹽性及遺傳多樣性研究.pdf

1、本文以自國外引進的23份野生高燕麥草為材料，通過不同鹽分梯度下各種質材料的苗期試驗，對鹽脅迫下高燕麥草的存活率、株高、分蘗數、植株干重、細胞膜透性、脯氨酸含量，K<'+>/Na<'+>在葉片中的積累、丙二醛含量、過氧化氫酶活性、光合特性等指標進行了系統的測定和分析，綜合評價其耐鹽能力的強弱，研究材料間耐鹽性的差異，并利用ISSR分子標記對供試材料的遺傳多樣性進行了分析。主要研究結果如下： (1)供試材料苗期耐鹽性綜合評價結果表明

2、：供試高燕麥草種質材料于中等耐鹽牧草，在濃度低于0.45％的NaCl脅迫下，23份供試材料均能正常存活，只有少數材料出現輕微受害現象；在0.5 5％---0.65％NaCl濃度下，有19份材料存活率在70％以上，所有材料的株高、植株干重下降明顯，分蘗數與質膜相對透性也受到較大影響；在0.85％NaCl濃度下，ZXY03-13、ZXY03-200等4份材料完全死亡，其余材料存活率均低于50％，受害程度嚴重。通過TOPSIS-PCA綜合評價

3、，以耐鹽綜合評價值的高低可以將23份供試材料初步分為五類，其中材料ZXY03P-367綜合評價值最高，達到0.9211，耐鹽性最強；材料ZXY03P-165、ZXY03P-200、ZXY03P-269、ZXY03P-95、ZXY03P-238、ZXY03P-184、ZXY03P-387、ZXY03P-462、ZXY03P-319、ZXY03P-148、ZXY03P-416的綜合評價值在0.8—0.9之間，屬于耐鹽性較好的材料；材料ZXY

4、03P-79、ZXY03P-60、ZXY03P-337、ZXY03P-133、ZXY04P-949、ZXY03P-31綜合評價值在0.7—0.8之間，屬于耐鹽性中等的材料；材料ZXY04P-991、ZXY03P-13、ZXY03P-133綜合評價值在0.6---0.7之間，屬于耐鹽性較弱的材料；材料ZXY03P-45、ZXY03P-443綜合評價值分別為0.5934、0.5629，耐鹽性最差。 (2)供試材料鹽脅迫下的生理生理特

5、性研究表明：鹽脅迫下高燕麥草的滲透調節(jié)系統，膜系統及光合系統均受到不同程度的損害，耐鹽能力較強的材料ZXY03-367、ZXY03-200等在脯氨酸含量、可溶性糖含量、鉀鈉含量比、葉片相對含水量、丙二醛含量、CAT活性、光合速率及葉綠素含量方面均高于不耐鹽的材料ZXY03-13、ZXY03-443等。主成分分析表明，鹽脅迫下高燕麥草的耐受性主要表現為滲透調節(jié)系統的自我保護，其貢獻率為44.98％；其次是膜系統和光合系統，貢獻率分別為19

6、.937％和15.286％。聚類分析表明，脯氨酸含量、可溶性糖含量、鉀鈉含量比、葉片相對含水量、丙二醛含量、CAT活性、光合速率及葉綠素含量也可作為綜合評價高燕麥草耐鹽能力強弱的指標。 (3)遺傳多樣性研究結果表明：通過模板DNA、引物、Mg<'+>、dNTPs、Taq酶五種ISSR反應體系的影響因素進行L<,16>(4<'5>)正交試驗，建立了高燕麥草ISSR反應體系：20μl的反應體積中含有模板DNA 5μmol/L，引物3

7、00nmol/L，Mg<'+>2.5mmol/L，dNTP 0.3mmol/L，Taq酶lU及1×Buffer。通過9個ISSR引物對23份野生高燕麥草種質材料進行擴增，共獲得88個擴增位點，擴增片段大小在280bp---1500bp之間，多態(tài)性位點為66個，多態(tài)性比率75％；遺傳相似系數(GS)分析表明，供試材料間的GS值在0.591—0.886之間，平均GS值0.667，說明供試材料的遺傳分化程度較高，遺傳多樣性豐富，運用ISSR分