大豆的SRAP遺傳多樣性及蛋白含量多樣性研究.pdf

1、本研究以分布在全國(guó)的113個(gè)大豆栽培品種和20個(gè)野生品種為材料，利用SRAP分子標(biāo)記技術(shù)研究其親緣關(guān)系與遺傳多樣性，用凱氏定氮法測(cè)定其蛋白含量，為大豆的品種鑒定、種質(zhì)資源保護(hù)、雜交親本選擇、分子標(biāo)記輔助育種和開發(fā)利用提供理論和技術(shù)依據(jù)。 主要內(nèi)容結(jié)果如下： 1、建立了大豆的SRAP反應(yīng)程序及體系。反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性3 min，然后前5個(gè)循環(huán)為94℃變性1 min，35℃退火1 min，72℃延伸1 min，后35個(gè)

2、循環(huán)僅將退火溫度升為50℃，最后72℃延伸7 min。擴(kuò)增反應(yīng)總體積為25μL，包括：1×buffer緩沖液，2.0 mmol/LMg2+，0.5μmol/L引物，250μmol/L，30 ng模板DNA和1.5U TaqDNA聚合酶?；谏鲜鲶w系，從288對(duì)引物組合中篩選出12對(duì)SRAP引物組合，對(duì)113個(gè)大豆品種和20個(gè)野生品種進(jìn)行擴(kuò)增，共擴(kuò)增出251條譜帶，其中多態(tài)性條帶220條，多態(tài)性譜帶比率為87.6％，等位基因數(shù)為1.904

3、4，有效等位基因數(shù)1.4796，期望雜合度為0.2874，Shannon多樣性為0.4375。根據(jù)133個(gè)大豆品種的Nei相似系數(shù)計(jì)算的遺傳距離，進(jìn)行聚類分析，繪制樹狀圖。在遺傳距離0.300處，將133個(gè)品種劃分為2個(gè)類群。其中20中野生品種“陽(yáng)谷短絨野生豆”、“野07-1”、“野07-2”、“野020312”、“野020137”、等聚為一類(A)，其余的栽培品種歸為一類(B)。栽培品種中又分為兩類，其中“豫豆25”、“豫豆27”、“

4、豫豆16”、“豫豆17”、“豫豆18”、“豫豆13”、“周89①-6-4”、“豫豆8號(hào)”、“豫豆10”、“鄭9525”、“豫豆26”、“豫豆21”、“豫豆22”、“中作983”、“豫豆20”等河南的主栽大豆品種聚為了一類(C)；“中豆27”、“淮陰92-34”、“中黃13”、“中豆8號(hào)”、“淮陰87-22”、“科豐36”、“中黃17”、“新六青”、“徐豆9號(hào)”、“泗豆280”、“皖豆16”、“MN413”等安徽蘇州其他省份的品種歸為了一

5、大類(D)。 2、測(cè)定了113個(gè)大豆栽培品種和20個(gè)野生大豆品種的蛋白含量，野生大豆的蛋白含量在49％-54％之間，均為高蛋白大豆，而栽培大豆的蛋白含量在36％-51％之間，既有高蛋白品種，又有低蛋白品種，從中篩選出高蛋白大豆材料。方差分析顯示，品種間蛋白含量表現(xiàn)為極顯著差異(P<0.01)，具有明顯的多態(tài)性。 3、比較113個(gè)栽培大豆和20個(gè)野生大豆的SRAP聚類與蛋白含量聚類發(fā)現(xiàn)兩者均把野生大豆聚為一類，而栽培大豆聚