SRAP標(biāo)記技術(shù)優(yōu)化與湖北油茶遺傳多樣性研究.pdf

1、油茶是我國南方特有的木本食用油樹種。湖北省是油茶的主產(chǎn)區(qū)之一，了解湖北省油茶的遺傳基礎(chǔ)是油茶種質(zhì)資源保護、品種改良和開發(fā)利用的基礎(chǔ)，也是發(fā)展壯大油茶產(chǎn)業(yè)的前提。本研究采用SRAP標(biāo)記對湖北省武漢新洲、黃石陽新、咸寧橫溝橋、黃岡紅安和恩施鶴峰5個居群的油茶遺傳多樣性進(jìn)行分析，計算了5個居群間的遺傳多樣性指數(shù)和樣品間的遺傳距離，構(gòu)建了樣品間的遺傳關(guān)系樹狀圖，從分子水平上揭示了我省油茶種質(zhì)資源現(xiàn)狀，探明了湖北省不同地區(qū)油茶種質(zhì)資源間的親緣關(guān)系

2、，為我省油茶種質(zhì)資源建立統(tǒng)一的分類標(biāo)準(zhǔn)提供參考，為雜交育種的親本選配提供理論依據(jù)；同時也證明了SRAP標(biāo)記技術(shù)在油茶遺傳基礎(chǔ)育種研究中的可行性，同時為利用SRAP標(biāo)記進(jìn)一步進(jìn)行油茶的分子輔助選擇育種研究打下了堅實的基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.建立了油茶SRAP-PCR的反應(yīng)體系并篩選合適的引物。通過單因素法對SRAP反應(yīng)體系進(jìn)行優(yōu)化，SRAP-PCR體系優(yōu)化結(jié)果是：Mg2+濃度1.6 mmol/L、引物濃度0.21μ m

3、ol/L、dNTPs濃度110μ mol/L、模板DNA量90 ng、Taq DNA聚合酶用量1.5 U；反應(yīng)程序中第二次退火溫度最適為49℃。隨后在36對引物組合中篩選出了11對重復(fù)性好、多態(tài)性高的引物。
　　 2.利用建立的體系，用11對引物對48個個體進(jìn)行擴增，獲得清晰的擴增條帶64條，其中多態(tài)性條帶60條，占93.75%；各材料間的遺傳相似性系數(shù)(GS)在0.469至0.906之間，平均GS值為0.653；居群平均有效等