B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤候選腫瘤干細(xì)胞群SP細(xì)胞的免疫表型研究.pdf

1、本文主要從以下兩個(gè)部分展開論述：
　　第一部分 淋巴瘤細(xì)胞系側(cè)群細(xì)胞的驗(yàn)證
　　目的：通過檢測(cè)淋巴瘤細(xì)胞系側(cè)群細(xì)胞（Side Population，SP）的方法研究淋巴瘤細(xì)胞系中是否存在腫瘤干細(xì)胞候選細(xì)胞并驗(yàn)證其干細(xì)胞特性。
　　方法：選用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞，提取為單個(gè)細(xì)胞后分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，對(duì)照組加入維拉帕米100μmol，30min后兩組均染Hoechst染料90min后上機(jī)檢測(cè)，用流式儀紫外激發(fā)

2、光檢測(cè)SP細(xì)胞。
　　結(jié)果：人彌漫大B淋巴瘤OCI-Ly8細(xì)胞系（人結(jié)腸癌DLD-1細(xì)胞系作為對(duì)照）均存在SP細(xì)胞，含量分別為2.4％和0.6％。人彌漫大B淋巴瘤OCI-Ly8細(xì)胞系克隆集落形成實(shí)驗(yàn)證明了SP細(xì)胞具有更強(qiáng)的克隆形成能力。
　　結(jié)論：人彌漫大B淋巴瘤OCI-Ly8細(xì)胞系存在SP細(xì)胞，且SP細(xì)胞具有干細(xì)胞特性。
　　第二部分 原代淋巴瘤側(cè)群細(xì)胞的鑒定及其免疫表型分析
　　目的：分析原代淋巴瘤標(biāo)本中SP

3、細(xì)胞的比例及免疫表型，以及探索非霍奇金淋巴瘤患者的SP水平與臨床疾病的關(guān)系。
　　方法：選取非霍奇金淋巴瘤患者的骨髓及淋巴結(jié)標(biāo)本，提取單細(xì)胞后用多色流式儀檢測(cè)其SP區(qū)域，SP區(qū)域的細(xì)胞可根據(jù)Hoechst染料熒光強(qiáng)度在前向角散射(forward scatter，F(xiàn)SC)和側(cè)向角散射(side scatter，SSC)圖上分為上下兩群，可定義為SPlow和SPhigh兩個(gè)亞群，并用流式熒光抗體分析其細(xì)胞表面標(biāo)記。
　　結(jié)果：統(tǒng)

4、計(jì)10例原代淋巴瘤標(biāo)本及4位正常對(duì)照組SP百分比平均值為3.6％和8.2％。10位病人標(biāo)本的SPlow百分比平均值為3.54％；SPhigh百分比平均值為2.4％；non-SP百分比平均值為20.72％。病人SPlow免疫表型為CD19dimCD20-、SPhigh免疫表型為CD19-CD20-、non-SP的免疫表型為CD19+CD20+。
　　結(jié)論：淋巴瘤患者原代標(biāo)本中可以檢測(cè)到SP細(xì)胞，平均值為8.2％，高于正常對(duì)照。SP細(xì)