高產(chǎn)褐藻酸酶菌株的篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化和褐藻酸酶酶學(xué)性質(zhì)的初步研究.pdf

1、本研究以篩選高效產(chǎn)褐藻酸酶菌株、研究酶的生物學(xué)效應(yīng)、酶學(xué)性質(zhì)及酶法降解褐藻膠制備褐藻膠寡糖為基本目的和出發(fā)點(diǎn)，從海洋環(huán)境中分離篩選出一株高產(chǎn)褐藻酸酶的菌株s4。 本實(shí)驗(yàn)利用褐藻酸鈉作為唯一的碳源從綠爛病海帶的病爛處篩選分離得到一株高產(chǎn)褐藻酸酶的菌株s4并對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：通過(guò)單次單因子實(shí)驗(yàn)確定褐藻酸降解菌株s4較優(yōu)的產(chǎn)酶培養(yǎng)基主要成分的濃度為(w/v)：褐藻酸鈉1.2％，氯化銨0.9％，NaCl 1.5％，較優(yōu)的

2、發(fā)酵產(chǎn)酶條件為：起始pH為7.5，25℃培養(yǎng)48h。 菌株s4在優(yōu)化后的發(fā)酵培養(yǎng)基中25℃培養(yǎng)48h后，經(jīng)離心、30％～90％的(NH<,4>)<,2>SO<,4>鹽析分級(jí)沉淀、CM-Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-100柱層析對(duì)褐藻酸酶進(jìn)行純化和精制，獲得了電泳純度的酶蛋白組分。SDS-PAGE確定其分子量為29kDa．該褐藻酸酶的最適作用溫度和最適反應(yīng)pH分別為40℃和7.0，酶活力在pH 6