灰樹花漆酶高產(chǎn)菌株的發(fā)酵及其酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf

1、隨著科技的日益進步，人們不但對高水平的生活追求提高了，而且對生活環(huán)境以及環(huán)保要求提到了前所未有的高度。漆酶作為一種純天然，無污染的材料在生活中的應(yīng)用日益廣泛，并且不斷的被人們所認可。本實驗首次用液體發(fā)酵法對食用菌灰樹花進行漆酶研究，液體發(fā)酵優(yōu)點在于，生長周期短、污染少、環(huán)境可控，得到的灰樹花漆酶的酶活最高達到17990U/mL。完全可以應(yīng)用于工業(yè)大規(guī)范生產(chǎn)。 本文主要研究了以下三方面內(nèi)容： 1.樣品制備穩(wěn)定性的研究

2、 灰樹花發(fā)酵產(chǎn)漆酶的最佳時間為10天；在不同溫度下，該酶的反應(yīng)速度以及耐受情況都表現(xiàn)不同的活力，漆酶的最適溫度約為40℃；漆酶在不同的pH下，其表現(xiàn)活性不同，pH1.8-3.0都表現(xiàn)出較高活力，在pH3.0達到最高活力，3.0為其最適反應(yīng)pH；可以看出0℃～40℃條件下漆酶相對穩(wěn)定，相對剩余酶活較高，當(dāng)溫度在40℃時相對剩余酶活力最高，為89％，溫度大于40℃后酶活迅速下降，60℃時相對酶活僅為40％漆酶在pH2.8-3.4時酶活力表

3、現(xiàn)很強的穩(wěn)定性，并且相對酶活力都在60％以上，但是當(dāng)超過pH超過3.4時，相對酶活急劇下降，隨著pH的繼續(xù)增大到5.2的時候，相對酶活繼續(xù)下降為20％；金屬離子對漆酶活力的影響：Cu2+，Co2+對漆酶有顯著的激活作用，F(xiàn)e3+對酶活有一定的抑制作用，而Ag-則完全抑制漆酶的活性，Na+、K+、Mg2+、Zn2+對酶影響相對Cu2+，Co2+不大?；覙浠ù制崦赋恋肀容^丹寧法，乙醇法，丙酮法，硫酸銨法，從得率和純度上得出硫酸銨沉淀法最適合

4、。 2.灰樹花漆酶的液體發(fā)酵條件的研究優(yōu)化 應(yīng)用正交實驗、均勻分析灰樹花漆酶的液體發(fā)酵條件。結(jié)論得出：灰樹花菌株搖瓶振蕩培養(yǎng)產(chǎn)生的漆酶比靜止培養(yǎng)產(chǎn)生的漆酶活力高，搖床培養(yǎng)10天，裝液量為50mL/250mL，轉(zhuǎn)速為120r/min時漆酶活力最高。通過設(shè)計正交實驗，用SPSS軟件分析的結(jié)果可以明顯的看出：灰樹花產(chǎn)生的漆酶的最佳碳源為葡萄糖，最佳氮源為蛋白胨，最適溫度為26℃，最適pH值為3.0，最適產(chǎn)酶培養(yǎng)基：葡萄糖10g