9002號海洋放線菌代謝產(chǎn)物抗腫瘤活性化合物的研究.pdf

1、該課題對中國膠州灣海域海平面下20米處的海泥樣品進(jìn)行微生物的分離純化,并通過溫敏型小鼠乳腺癌細(xì)胞株tsFT210細(xì)胞周期抑制、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)篩選模型篩選,初篩得到20株代謝產(chǎn)物具有良好抗腫瘤活性的放線菌.經(jīng)過活性的復(fù)篩、代謝產(chǎn)物穩(wěn)定性測試、發(fā)酵液萃取等預(yù)實(shí)驗(yàn)選取其中一株編號為9002的放線菌.確定活性菌株后測試其生長曲線,根據(jù)生長特征進(jìn)行大量發(fā)酵,有機(jī)溶劑提取得到代謝產(chǎn)物浸膏.利用對代謝產(chǎn)物進(jìn)行提取分離和活性追蹤同步進(jìn)行的方法,對9002

2、菌株的發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行活性成分追蹤分離.9002的菌懸液和菌絲體分別用氯仿萃取,然后將兩個成分合并.對得到的有效活性部位采用正相減壓硅膠柱層析、常壓硅膠柱層析、凝膠柱層析(Sephadex LH-20)、反相硅膠柱層析、反相制備高效液相(PHPLC)等分離手段得到6個單體化合物、2個差向異構(gòu)體的混合物和1個結(jié)構(gòu)未確定的化合物.根據(jù)理化性質(zhì)和各種波譜學(xué)方法,鑒定了其中6個單體化合物和2個差向異構(gòu)體的結(jié)構(gòu).SRB活性測試實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明化合物(1)

3、、(2)、(3)、(4)、(6)對tsFT210小鼠乳腺癌細(xì)胞的生長具有抑制作用.通過tsFT210小鼠乳腺癌細(xì)胞周期抑制、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)篩選模型篩選發(fā)現(xiàn)化合物(3)、(6)具有抗腫瘤活性.綜上所述,該項(xiàng)研究工作自海洋放線菌9002中分離得到6個化合物和2個差向異構(gòu)體,其中含有7個環(huán)縮二氨酸化合物和一個吡啶類化合物.首次發(fā)現(xiàn)了化合物6具有G<,2>/M周期抑制作用,化合物3具有細(xì)胞壞死和G<,0>/G<,1>周期抑制活性.該實(shí)驗(yàn)為開發(fā)應(yīng)用