海洋來源放線菌的篩選及兩株放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、海洋放線菌次生代謝產(chǎn)物存在著多樣和新異的結(jié)構(gòu)類型，這些新的化合物對(duì)于尋找到治療新疾病的先導(dǎo)化合物是一個(gè)重要的資源庫。為了尋找具有新的抗菌、細(xì)胞毒活性的天然產(chǎn)物，本文選取了從中國(guó)南海珊瑚組織中分離純化得到的放線菌作為研究對(duì)象，開展了抗菌、抗細(xì)胞毒活性次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究工作，研究?jī)?nèi)容主要包括：活性菌株的篩選和發(fā)酵條件的考察；代謝產(chǎn)物的分離純化及結(jié)構(gòu)的初步鑒定。
　　通過建立以活性篩選為主、化學(xué)篩選為輔的二級(jí)組合篩選模式，采取簡(jiǎn)單培養(yǎng)基

2、初篩、培養(yǎng)基多項(xiàng)選擇復(fù)篩的步驟，對(duì)56株從中國(guó)南海叢生盔形珊瑚(Galaxea fascicularis)，澄黃濱珊瑚(Porites lutea)，多孔鹿角珊瑚(Acropora millepora)三株珊瑚中分離出來的海洋放線菌發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行了生物活性和化學(xué)的篩選。對(duì)經(jīng)過初篩獲得的19株放線菌進(jìn)行了抗鹵蟲復(fù)篩，復(fù)篩菌株占篩選菌株的比例為：33.9％。綜合初篩與復(fù)篩的生物活性篩選結(jié)果，共獲得目標(biāo)活性菌株5株。對(duì)5株潛在目標(biāo)活性菌株進(jìn)行了

3、培養(yǎng)基多項(xiàng)選擇復(fù)篩工作。通過HPLC和LC-MS檢測(cè)的方法，篩選出次級(jí)代謝產(chǎn)物豐富、產(chǎn)量高、活性好的菌株Streptomyces sp.SCSIO11469作為下一步放大發(fā)酵的菌株。
　　對(duì)珊瑚共附生放線菌 Streptomyces sp.SCSIO11469進(jìn)行放大培養(yǎng)，采用HPLC-UV追蹤的方式，利用丙酮、乙酸乙酯等溶劑對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物提取萃取，使用硅膠、凝膠、反相硅膠等柱色譜分離手段，從該株菌的乙酸乙酯萃取物中分離純化得到四個(gè)單