三株放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的初步研究.pdf

1、放線菌(Actinomycetes)在產(chǎn)生抗生素方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，大約75％的抗生素都是由放線菌產(chǎn)生，而其中的75％是由放線菌中的鏈霉菌屬(streptomyces)產(chǎn)生。從土壤鏈霉菌中分離到的大部分抗生素至今仍然被廣泛使用；但由于微生物耐藥性的產(chǎn)生，急需發(fā)現(xiàn)新的抗生素。除了從土壤鏈霉菌中分離新化合物，還應(yīng)積極尋找其他來(lái)源的微生物，植物內(nèi)生菌由于生境特殊，有可能產(chǎn)生更多類型、結(jié)構(gòu)新穎的化合物，成為微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物的重要來(lái)源。

2、 本論文以云南西雙版納熱帶雨林中的喬木滑桃樹(shù)為研究對(duì)象，從滑桃樹(shù)種子中分離到7株內(nèi)(共)生放線菌A2、A3、A4、A5、A6，A7、A9。對(duì)抗橙色青霉活性較好的菌株A2進(jìn)行了16S rDNA序列分析及形態(tài)鑒定，確定為streptomyces sp.，對(duì)其進(jìn)行2升平板發(fā)酵和化學(xué)成分分析，經(jīng)液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)檢測(cè)到含氯特征峰，保留時(shí)間與美登木素一致；經(jīng)大量發(fā)酵18升，分離純化、鑒定了5個(gè)化合物，分別鑒定為(+)Nonactic a

3、cid，homononactic acid，macrotetrolide，1-acetate-4-hydroxy-Benzeneethanol，5-Methyl-6-acetyIresorcinol；但未分離和檢測(cè)到含氯的特征峰。 本論文還對(duì)一株土壤鏈霉菌Streptomyces sp.XM201和產(chǎn)南昌霉素吸水鏈霉菌突變體△M的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行研究。從Streptomyces sp.XM201的YEME平板發(fā)酵物中分離5個(gè)聚醚

4、類化合物，分別鑒定為nigericin，30-acetyl nigericin，1-O-methyl-30-acetyl nigericin，1，29-O-dimethyl-30-acetyl nigericin(新化合物)，29-O-methyl abierixin(新化合物)；從pJTU81 3/△asm25 Streptomycessp.XM201突變株YEME液體發(fā)酵產(chǎn)物中分離鑒定了2個(gè)化合物：Lebstatin，17-O-de

5、methyl-1ebstatin。從產(chǎn)南昌霉素吸水鏈霉菌突變體△M的發(fā)酵產(chǎn)物中分離鑒定了1個(gè)化合物：4'-O-demethyl nanchangmycin。 對(duì)nigericin及其系列化合物分別進(jìn)行了生物活性測(cè)試。對(duì)金黃色葡萄球菌(S.aureus ATCC25923)、大腸桿菌CMCC441 03(E.coil CMCC44103)、臘質(zhì)芽孢桿菌(B.cereus 1126)、白色假絲酵母AS2.538(C.albicans

6、AS2.538)的活性測(cè)定表明，nigericin和30-acetylnigericin二者有強(qiáng)的抗金黃色葡萄球菌的活性，MIC均為0.125μg/ml，并且對(duì)大腸桿菌和臘質(zhì)芽孢桿菌原生質(zhì)體的再生都有極大的影響，當(dāng)nigericin和30-acetyl nigericin濃度為1 μg/Iml時(shí)，大腸桿菌和臘質(zhì)芽孢桿菌的再生克隆數(shù)均小于20；但他們對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌和真菌都沒(méi)有活性。同時(shí)，MTT法測(cè)定了nigericin對(duì)人肝癌細(xì)胞HEP

7、G-2的活性，IC50為0.36μg/ml?；钚詼y(cè)定結(jié)果提示：C30位的羥基可能與離子轉(zhuǎn)運(yùn)無(wú)明顯相關(guān)；nigericin的C1位羧基是離子轉(zhuǎn)運(yùn)所必需的。 通過(guò)對(duì)滑桃樹(shù)共生菌streptomyces sp.A2的兩次發(fā)酵產(chǎn)物的分離結(jié)果表明，盡管在大量發(fā)酵產(chǎn)物中并未分離到美登木素類化合物，LC-MS檢測(cè)結(jié)果不排除streptomyces sp.A2有產(chǎn)生美登木素類化合物的潛能，有待通過(guò)進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證。 從土壤鏈霉菌Str