落葉松-楊柵銹菌生理小種的SCAR標(biāo)記.pdf

1、落葉松一楊柵銹菌生理小種的SCAR標(biāo)記摘要落葉松一楊柵銹菌(Mela仰soralarici夕丈少擬linaKleb.)又稱青楊葉銹病，廣泛分布于世界各楊樹栽植區(qū)，可危害青楊派，黑楊派及其雜交楊，甚至胡楊等多種楊樹，是楊樹銹病中分布最廣，危害最大的一種病害。該菌種內(nèi)分化明顯，遺傳背景復(fù)雜。歐洲、北美曾報道過該菌的5個生理小種，我國也相繼發(fā)現(xiàn)該菌生理小種分化現(xiàn)象。但是，以往的研究上沒有找到該病原物的特異性分子標(biāo)記。鑒于此，本研究主要從以下幾

2、個方面進(jìn)行研究，以期在中國落葉松一楊柵銹菌特異性分子標(biāo)記研究方面有所突破。(1)確立優(yōu)化的RAPD擴(kuò)增體系。眾所周知，RAPD用于病原物DNA分子生物學(xué)標(biāo)記時，有其自身的缺點—不穩(wěn)定，易受環(huán)境條件影響，甚至不同的實驗室、實驗人做出的結(jié)構(gòu)都有可能大相徑庭，這些缺點為RAPD研究結(jié)果的交流帶來極大不便，幾近不能用于交流。本試驗本著優(yōu)化RAPD體系，使R八PD試驗結(jié)果便于交流的原則，仔細(xì)、逐個的優(yōu)化RAPD反映體系中的各個因素，最終確定了一個

3、比較合適的RAPD反應(yīng)體系。(2)尋找特異的分子標(biāo)記。在中國落葉松一楊柵銹菌的研究方面，中國的學(xué)者作了大量的研究，但是涉及落葉松一楊柵銹菌特異性分子標(biāo)記的研究比較少。本試驗在大量的篩選隨機(jī)引物的基礎(chǔ)上，利用優(yōu)化的RAPD體系篩選出中國落葉松一楊柵銹菌1號、3號、4號、5號生理小種的特異性RAPD標(biāo)記。(3)建立中國落葉松一楊柵銹菌1號、4號、5號生理小種的SCAR標(biāo)記。本試驗對尋找到的特異性RAPD標(biāo)記做了進(jìn)一步轉(zhuǎn)化，試圖建立中國落葉松

4、一楊柵銹菌的SCAR標(biāo)記。經(jīng)過試驗，成功獲得1號、4號、5號生理小種的SCAR標(biāo)記。這為中國落葉松楊柵銹菌的生理小種快速鑒定，流行種群監(jiān)測以及檢測提供了更為有效的方法關(guān)鍵詞:落葉松一楊柵銹菌:RAPD:SCAR:分子檢測研究生學(xué)位論文的獨創(chuàng)性聲明本人聲明:所呈交的學(xué)歷碩士學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨立進(jìn)行的研究工作及取得的研究結(jié)果論文中的研究數(shù)據(jù)及結(jié)果是按學(xué)?！蛾P(guān)于規(guī)范西北農(nóng)林科技大學(xué)研究生學(xué)術(shù)道德的暫行規(guī)定》獲得的，如果違反此規(guī)定，

5、一切后果與法律責(zé)任均由本人承擔(dān)。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究結(jié)果，也不包含其他人和自己本人已獲得西北農(nóng)林科技大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文的致謝中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名‘要耘低時間:鉀年‘’“日導(dǎo)師指導(dǎo)研究生學(xué)位論文的承諾本人承諾:我的學(xué)歷碩士研究生所呈交的學(xué)歷碩士學(xué)位論文是在我指導(dǎo)下獨立開展研究工

6、作及取得的研究結(jié)果，屬于我現(xiàn)崗職務(wù)工作的結(jié)果，并嚴(yán)格按照學(xué)?！蛾P(guān)于規(guī)范西北農(nóng)林科技大學(xué)研究生學(xué)術(shù)道德的暫行規(guī)定》而獲得的研究結(jié)果.如果違反學(xué)?！蛾P(guān)于規(guī)范西北農(nóng)林科技大學(xué)研究生學(xué)術(shù)道德的暫行規(guī)定》，我必須接受按學(xué)校有關(guān)規(guī)定的處罰處理并承擔(dān)相應(yīng)導(dǎo)師連帶責(zé)任。導(dǎo)師簽名:產(chǎn)沁洲時間:，.產(chǎn)鄉(xiāng)月了日關(guān)于其他單位與人員對研究生學(xué)位論文使用授權(quán)的說明任何收存和保管本論文各種版本的單位和個人未經(jīng)本論文作者的導(dǎo)師授權(quán)，不得有對本論文進(jìn)行復(fù)制、修改、發(fā)行、