中藥復方?？奠`抗老年性癡呆作用機制研究.pdf

1、目的：
　　 優(yōu)化中藥復方?？奠`的組方,探討中藥復方?？奠`對Aβ致神經(jīng)細胞損傷保護的作用及作用機制;證明海康靈對Aβ腦內(nèi)注射致癡呆動物學習記憶功能障礙的改善作用;為?？奠`抗老性年癡呆的臨床應用,為中藥多靶點的作用機制提供有效的實驗數(shù)據(jù)及理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 第1部分中藥復方?？奠`組方的優(yōu)化:采用體外細胞培養(yǎng)的方法,建立SH-SY5Y神經(jīng)細胞H2O2損傷模型。通過測定細胞存活率(MTT法),檢測?？奠`復方

2、中單味藥與復方對SH-SY5Y神經(jīng)細胞損傷的保護作用。
　　 第2部分中藥復方海康靈對Aβ致神經(jīng)細胞損傷保護的作用及機制:采用體外細胞培養(yǎng)的方法,建立SH-SY5Y神經(jīng)細胞Aβ?lián)p傷模型。通過測定細胞存活率(MTT法),檢測優(yōu)化后的海康靈對SH-SY5Y神經(jīng)細胞損傷的保護作用;倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),通過Hoechst染色檢測細胞凋亡。
　　 第3部分優(yōu)化后的海康靈對Aβ腦內(nèi)注射致癡呆動物的影響;通過對大鼠腦內(nèi)注射Aβ1

3、-40造成癡呆模型,采用Morris水迷宮觀察?？奠`對腦內(nèi)注射Aβ1-40所致障礙大鼠學習記憶功能的影響。檢測優(yōu)化后的?？奠`對A B腦內(nèi)注射致癡呆動物的神經(jīng)保護作用。
　　 結果：
　　 第1部分:根據(jù)最佳有效劑量組建的海康靈新復方(濃度為0.1.59g·ml-1)同單味藥和原復方比較,能減輕H2O2引起的SH-SY5Y神經(jīng)細胞的損傷,明顯提高細胞的存活率(P＜0.01)。
　　 第2部分:根據(jù)最佳有效劑量組建的

4、?？奠`新復方(濃度為0.159g·ml-1)同單味藥和原復方比較,能減輕Aβ引起的SH-SY5Y神經(jīng)細胞的損傷,提高細胞的存活率(P＜0.01),能有效抑制Aβ致神經(jīng)細胞的凋亡。
　　 第3部分:Morris水迷宮行為測試結果顯示,服用?？奠`新復方的大鼠90s內(nèi)在定位航行實驗中大鼠的逃避潛伏期和游泳距離縮短?？臻g探索實驗中大鼠原平臺所在象限的游泳時間延長、第一次到達原平臺時間縮短、穿越原平臺的次數(shù)增加。腦組織生化指標結果顯示,大

5、鼠預先給予海康靈30d降低了Aβ1-40導致的MDA生成的增多,升高SOD和GSH-Px的活性,提高AchE活性。血液生化指標結果顯示,預先給予大鼠海康靈后可使血中TG、T-CHO的含量下降,HDL-C升高,提示海康靈具有一定的降血脂、防止動脈粥樣硬化的作用。
　　 結論：
　　 ?？奠`新復方對H2O2和Aβ誘導的SH-SY5Y神經(jīng)細胞損傷具有明顯保護作用。
　　 ?？奠`新復方能改善腦內(nèi)注射Aβ1-40所致障礙大