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文檔簡介
1、目的:微量元素硒和鋅在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的含量是比較豐富的,并且在維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)正常的生理功能起到特別重要的作用。本文主要從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)兩個(gè)方面進(jìn)行,研究硒、鋅對β淀粉樣蛋白(Aβ25-35)誘導(dǎo)胚鼠神經(jīng)元細(xì)胞神經(jīng)毒性的保護(hù)作用和對癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙及腦組織生化指標(biāo)改變的影響。
方法:體外實(shí)驗(yàn):將胚鼠神經(jīng)元細(xì)胞用10mol/L的Aβ25-35處理,建立體外老年癡呆模型。采用了細(xì)胞形態(tài)學(xué)方法、噻唑藍(lán)比色法(MTT)、乳
2、酸脫氫酶(LDH)檢測法、微量丙二醛(MDA)檢測法、過氧化氫(H2O2)含量檢測法、一氧化氮(NO)含量檢測法、蛋白印跡方法檢測糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、磷酸化Tau蛋白(Ph-Tau)水平。
體內(nèi)實(shí)驗(yàn):取60只雄性昆明小鼠,體重18-20 g,隨機(jī)分組成6組,每組10只,每只小鼠按0.1ml/10g的劑量給藥。用D-半乳糖連續(xù)腹腔注射50天建立小鼠癡呆模型,灌胃給予硒、鋅進(jìn)行保護(hù),連續(xù)染毒45天,實(shí)驗(yàn)時(shí)間共50
3、天,每天觀察動(dòng)物一般癥狀,采用避暗實(shí)驗(yàn)、穿梭實(shí)驗(yàn)、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)觀察小鼠學(xué)習(xí)記憶能力,通過生化檢測方法檢測小鼠腦組織丙二醛(MDA)、乙酰膽堿酯酶(AchE)、單胺氧化酶(MAO)變化。
結(jié)果:體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果:Aβ25-35損傷組與對照組比較MTT代謝率下降,LDH釋放量增多,MDA含量增高,H2O2含量增高,NO含量增高,GSK-3β、Ph-Tau水平增高,硒、鋅和硒鋅聯(lián)合處理組均不同程度地減少Aβ25-35的細(xì)胞毒性,硒保護(hù)作用差
4、異顯著。
體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:模型組小鼠與硒、鋅各給藥組小鼠相比,避暗實(shí)驗(yàn)顯示潛伏期縮短,進(jìn)入暗室次數(shù)增加,穿梭實(shí)驗(yàn)顯示潛伏期縮短,電擊穿梭次數(shù)增加;跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)潛伏期縮短,錯(cuò)誤率增加,腦組織內(nèi)的單胺氧化酶(MAO)、乙酰膽堿酯酶(AchE)活性和丙二醛(MDA)含量都明顯增高。提示硒、鋅和硒鋅聯(lián)合處理組均不同程度地改善小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙,降低腦組織內(nèi)MAO、AchE、MDA含量。
結(jié)論:微量元素硒、鋅對Aβ25-35處理胚鼠神
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