兩種海參極性脂質(zhì)對Aβ致老年性癡呆的保護(hù)作用研究.pdf

1、阿爾茲海默病(Alzheimer's Disease，AD)，又稱老年性癡呆，是一種以腦內(nèi)神經(jīng)元損傷及認(rèn)知功能障礙為主要表現(xiàn)的神經(jīng)退行性疾病，其病理學(xué)特征包括神經(jīng)纖維纏結(jié)及腦內(nèi)淀粉樣沉淀的形成。Aβ是腦內(nèi)淀粉樣沉淀的重要組成成分，近年來諸多研究表明其在老年性癡呆的發(fā)病過程中發(fā)揮著重要的作用。作為藥食兩用的傳統(tǒng)海珍品，海參具有多種活性成分，如海參皂苷、海參多糖、海參脂質(zhì)等。有研究表明海參磷脂具有抗氧化能力，可改善因癡呆造成的學(xué)習(xí)和認(rèn)知能力

2、障礙，但有關(guān)海參極性脂質(zhì)在Aβ沉積方面的作用仍鮮見報(bào)道。本文首先建立兩種AD體外模型評價(jià)海參極性脂質(zhì)在Aβ?lián)p傷方面的保護(hù)作用及對突觸生長的促進(jìn)作用，在此基礎(chǔ)上利用動物模型進(jìn)一步評價(jià)了海參腦苷脂在改善學(xué)習(xí)和認(rèn)知能力方面的作用，并探討了其作用機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:
　　本文采用Aβ25-35損傷PC12細(xì)胞及APP/PS1雙轉(zhuǎn)細(xì)胞，分別建立了兩種不同的AD模型，并依此探究了海參腦苷脂和海參磷脂的神經(jīng)保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Aβ25-

3、35可明顯降低PC12細(xì)胞的存活率，損傷細(xì)胞形態(tài);海參腦苷脂預(yù)處理后可增加PC12細(xì)胞的存活率，抑制LDH漏出，保護(hù)細(xì)胞膜的完整性，降低促凋亡基因Bax、Caspase-9和Caspase-3的表達(dá)并使GSK-3β的表達(dá)量恢復(fù)正常，表明海參腦苷脂抗Aβ25-35損傷作用可能依賴于其抗凋亡活性。在APP/PS1雙轉(zhuǎn)細(xì)胞體系中，海參磷脂可抑制其細(xì)胞外Aβ1-40和Aβ1-42的分泌量，高劑量時可降低細(xì)胞內(nèi)APP的蛋白表達(dá)量，具有一定的神經(jīng)保

4、護(hù)的作用。
　　與此同時，本文通過在低營養(yǎng)環(huán)境下孵育PC12細(xì)胞，探究海參極性脂質(zhì)在促突觸重塑方面的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，海參極性脂質(zhì)可促進(jìn)PC12細(xì)胞突觸重塑，其作用機(jī)制可能依賴于刺激突觸素和GAP-43的表達(dá)，使其維持在正常水平，從而抑制營養(yǎng)缺乏導(dǎo)致的細(xì)胞損傷。
　　在體外實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，本文選取海參腦苷脂為研究對象，利用快速老化小鼠SAMP8小鼠為動物模型，通過多種行為學(xué)測定方法，進(jìn)一步研究海參腦苷脂對老年性癡呆的影響。實(shí)

5、驗(yàn)結(jié)果顯示，SAMP8小鼠表現(xiàn)出明顯的學(xué)習(xí)和認(rèn)知能力障礙，而海參腦苷脂飲食干預(yù)后，Barnes迷宮實(shí)驗(yàn)中小鼠找到目標(biāo)箱的潛伏期和錯誤次數(shù)明顯降低，Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中小鼠找到隱藏平臺的潛伏期縮短、穿越平臺次數(shù)增加、目標(biāo)象限停留時間明顯延長，表明海參腦苷脂可以提高小鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力，改善認(rèn)知障礙。
　　結(jié)合動物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，本文通過對SAMP8小鼠海馬區(qū)內(nèi)Aβ和GAP-43含量及腦組織、肝臟組織和血清中相關(guān)氧化應(yīng)激指標(biāo)

6、的測定，探究海參腦苷脂改善學(xué)習(xí)和記憶能力的作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，SAMP8小鼠海馬組織內(nèi)Aβ含量明顯增多，GAP-43含量顯著下降，腦內(nèi)出現(xiàn)嚴(yán)重的氧化應(yīng)激現(xiàn)象，但海參腦苷脂可明顯改善小鼠海馬組織內(nèi)Aβ沉積現(xiàn)象、降低NO、MDA、8-OHdG及8-oxo-G的含量并升高SOD活力，表明海參腦苷脂可通過降低SAMP8小鼠海馬組織內(nèi)Aβ含量，提高腦內(nèi)抗氧化物酶活力，抑制NO毒性，降低腦內(nèi)脂質(zhì)、DNA和RNA的過氧化現(xiàn)象，提高小鼠的學(xué)習(xí)和記憶